目的 利用RNA干扰(RNA interference,RNAi)技术沉默凋亡抑制蛋白基因Livin基因在人肺腺癌细胞株SPC-A-1中的表达,探讨Livin基因表达沉默对SPC-A-1裸鼠移植瘤生长的影响.方法 以慢病毒为载体,将携带针对Livin基因短发夹RNA(short hairpin RNA,shRNA)及无关序列片段的shRNA转染SPC-A-1细胞,转染成功后将转染Livin shRNA的SPC-A-1细胞(实验组)、转染无关序列的SPC-A-1细胞(阴性对照组)及未转染任何序列的SPC-A-1细胞(空白对照组)分别接种于BALB/C裸鼠右腋皮下,复制SPC-A-1裸鼠皮下移植瘤模型,观察各组细胞在裸鼠体内的成瘤时间、成瘤率、瘤体体积及重量,绘制肿瘤生长曲线并计算抑瘤率;RT-PCR、免疫组织化学法分别检测Livin mRNA及蛋白的表达情况,原位末端转移酶标记法(TdT-mediated dUTP nick end labeling,TUNEL)检测移植瘤组织凋亡情况.结果 与空白对照组、阴性对照组比较,实验组裸鼠移植瘤成瘤时间晚,瘤体生长缓慢(F=70.509,P<0.01),体积抑瘤率达(59.5±3.4)
作者:陈愉生;李友堂;李鸿茹;陈小岩;林立芳
来源:中华结核和呼吸杂志 2011 年 34卷 1期