目的 建立免疫磁珠荧光量子点技术检测MTB的方法,探讨最佳检测条件并进行初步评估.方法 以MTB标准株H37 Rv、12种非结核分枝杆菌(NTM)标准株及3种非分枝杆菌为检测对象,免疫磁珠和功能化荧光量子点作用为对照组.利用湿化学方法制备纳米磁珠和荧光量子点,分别与MTB结合肽H8偶联,获得同时与H37 Rv作用的免疫磁珠和功能化荧光量子点,形成三元复合物结构,通过测量荧光值及荧光显微镜观察判定样品中是否存在MTB,建立纳米技术检测MTB的新方法,进一步探讨免疫磁珠和功能化荧光量子点的最佳检测浓度及作用时间.利用菌悬液和模拟痰标本,对该检测方法的检测下限和特异度进行初步评估.结果 偶联的免疫磁珠和功能化荧光量子点均能与H37 Rv结合,镜下可见其与H37 Rv作用的三元复合物,实验组与对照组的荧光值比值约为4:1;免疫磁珠和功能化荧光量子点最佳检测浓度均为100 mg/L,最佳作用时间为2 h;H37Rv菌悬液和模拟痰标本检测下限均为103 CFU/ml;特异度检测结果,3种非分枝杆菌在显微镜下均未见红色荧光,荧光值小于对照组,为阴性;12种NTM菌悬液和模拟痰标本检测时,仅副偶发分枝杆菌、金色分枝杆菌、耻垢分枝杆菌和偶发分枝杆菌在显微镜下可见红色荧光,荧光值与对照组的比值均>2,判断为阳性,其余均为阴性.结论 免疫磁珠
作者:马慧;胡忠义;王祎龙;秦莲花;陈海珍;陆俊梅;杨华
来源:中华结核和呼吸杂志 2013 年 36卷 2期