目的:研究脂肪间充质干细胞(AD-MSC)在利拉鲁肽(Liraglutide)的协同作用下对脂多糖(LPS)诱导的小鼠急性肺损伤(ALI)的保护作用。方法:将体外培养的AD-MSC细胞悬液充分混匀后按照相同的细胞数量和体积分为3组:对照组、LPS组(30 mg/L)以及LPS(30 mg/L)+利拉鲁肽(10 nmol/L)组。MTT实验检测6、24、48、72 h时各组AD-MSC的增殖情况;AnnexinV-FITC/PI双染流式细胞术检测3组细胞的凋亡情况;体外培养72 h,Western blot检测3组细胞凋亡相关蛋白cleaved caspase-3、Bax及Bcl-2的表达。体内实验中将60只雄性SPF级BALB/c小鼠,按照随机数字表随机分为5组:对照组、急性肺损伤模型组(ALI组)、ALI+脂肪间充质干细胞组(ALI+AD-MSC组)、ALI+利拉鲁肽组(ALI+Liraglutide组)、ALI+脂肪间充质干细胞+利拉鲁肽组(ALI+AD-MSC+Liraglutide组),观察小鼠的一般情况,分别在LPS刺激造模后2 d和7 d取小鼠肺组织,HE染色检查小鼠肺部的病理变化,并进行肺损伤评分;免疫组织化学检测小鼠肺组织,观察间充质干细胞标志性蛋白Nanog的表达变化;收集小鼠BALF,瑞氏-姬姆萨染色法计数BALF中性粒细胞数量;测定小鼠肺组织湿/干比重(W/D)。结果:AD-MSC在LPS的刺激下细胞凋亡明显高于对照组(
P<0.05)
作者:冯耘;杨晓彤;王林林;瞿介明;宋元林
来源:中华结核和呼吸杂志 2020 年 43卷 9期