目的：建立耐奥沙利铂（ L-OHP）的人结直肠癌耐药细胞株（ HT-29／L-OHP），检测相关耐药基因LAPTM4β的表达，探讨其在L-OHP耐药中的作用机制。方法采用药物浓度梯度递增间歇诱导法建立人结直肠癌耐药株HT-29／L-OHP；应用LAPTM4β-35蛋白抑制剂作用于HT-29／L-OHP细胞株后，流式细胞技术检测细胞凋亡，比较其与HT-29／L-OHP细胞株对于L-OHP的耐药情况；应用RT-PCR检测LAPTM4βmRNA的表达；应用Western blot测定LAPTM4β-35蛋白的表达。结果成功建立人结直肠癌耐药细胞株HT-29／L-OHP，流式细胞技术检测结果表明应用LAPTM4β-35蛋白抑制剂作用于HT-29／L-OHP细胞株后，其对于L-OHP的耐药明显低于HT-29／L-OHP细胞株。 HT-29／L-OHP细胞株中LAPTM4βmRNA表达水平明显高于亲本细胞株HT-29，分别为5．613±0．139和1．105±0．187，（P＜0．05），LAPTM4β-35蛋白在HT-29／L-OHP细胞和HT-29细胞的相对表达量2．203±0．080和1．033±0．070，（P＜0．05）。结论 LAPTM4β在结直肠癌耐药细胞株中过表达，与结直肠癌奥沙利铂耐药密切相关，可以作为结直肠癌耐药的一个敏感的生物学标志物。
作者：黄跃南；宁丽；李云龙；游柳平；王春敬；刘家麒
来源：中华结直肠疾病电子杂志 2015 年 5期
