目的构建以人细胞毒性T淋巴细胞抗原4 (cytotoxic T lymphocyte-associated antigen 4,CTLA4)为引导的抗变形链球菌(Streptococcus mutans, S. mutans)葡糖基转移酶(glucosyltransferase,GTFs)Ⅰ和表面蛋白PAc的靶向融合防龋DNA疫苗pGJA-P,检测其在真核细胞中的表达.方法利用RT-PCR方法从外周淋巴细胞中获得CTLA4胞外区和Igγ1恒定区基因并进行T-A克隆,获得携带CTLA4-Ig融合基因的重组质粒pGJ,选择合适的酶切位点,再克隆入融合防龋DNA疫苗pGLUA-P中,构建靶向融合防龋DNA疫苗pGJA-P,并转染CHO细胞系,用蛋白质免疫印迹实验检测其表达.结果重组质粒pGJ、pGJA-P分别含有CTLA4- Igγ1融合基因和CTLA4-、Igγ1、pac、glu基因序列.蛋白质免疫印迹结果显示,pGJA-P表达的抗原可以与特异性抗PAc抗体发生免疫反应.结论成功构建了靶向融合防龋DNA疫苗pGJA-P,并可在真核细胞中正确表达.
作者:郭继华;樊明文;边专;贾荣;陈智;彭彬
来源:中华口腔医学杂志 2003 年 38卷 4期