目的 用人工合成的耐药相关基因细胞周期蛋白D1(cyclin D1)的小分子干扰RNA(siRNA)处理人舌鳞癌顺铂耐药细胞系(Tca8113-CDDP), 探讨对靶基因转录调控的作用效果以及剂量和时间效应关系,为耐药性逆转提供实验依据.方法 CY3荧光素标记阳性对照基因甘油醛-3-磷酸脱氢酶(GAPDH)siRNA,分别于转染后4、24、48、72 h在激光共聚焦显微镜下观察瞬时转染率, 优化转染条件.用SYBR绿色荧光染料法、实时定量PCR技术分析目的基因mRNA的表达情况,同时采用蛋白印迹(Western blot)检测目的基因蛋白水平的表达.四甲基偶氮唑盐法检测cyclin D1 siRNA处理后细胞对顺铂敏感性的影响.结果 优化转染条件后,Tca8113-CDDP细胞中CY3 的GAPDH siRNA转染率达90
作者:周晓健;张志愿;张萍;潘红芽;陈万涛;叶冬霞
来源:中华口腔医学杂志 2006 年 41卷 11期