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目的 探讨鼠颊黏膜干细胞的体外分离和培养方法,以获得稳定生长的黏膜干细胞.方法 DispaseⅡ酶和Trypsin-EDTA两步法分离昆明小鼠颊黏膜上皮细胞,接种于以小鼠成纤维细胞NIH3T3细胞为滋养层的培养板中.达尔伯克氏必需基本培养基(Dulbecco's minimum essential medium,DMEM)培养24 h后换用角质细胞无血清培养基(keratinocyte serum-free medium,K-SFM)继续培养,部分细胞72 h后行成骨、成脂诱导和改良型Kaplow碱性磷酸酶(alkaline phosphatase,ALP)染色鉴定;部分细胞继续培养5 d后,消化转移至Ⅳ型胶原预包被的培养板中,加入黏膜干细胞培养基培养,观察细胞克隆形成和成骨、成脂诱导、兔抗鼠角蛋白和ALP染色结果.结果 初次分离的上皮细胞群83.96

作者:陶谦;乔彬;苏凯;吕标;郑超群

来源:中华口腔医学杂志 2008 年 43卷 5期

知识库介绍

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作者:
陶谦;乔彬;苏凯;吕标;郑超群
来源:
中华口腔医学杂志 2008 年 43卷 5期
标签:
口腔黏膜 干细胞 细胞分离 细胞培养技术 Mouth mucosa Stem cells Cell separation Cell culture techniques
目的 探讨鼠颊黏膜干细胞的体外分离和培养方法,以获得稳定生长的黏膜干细胞.方法 DispaseⅡ酶和Trypsin-EDTA两步法分离昆明小鼠颊黏膜上皮细胞,接种于以小鼠成纤维细胞NIH3T3细胞为滋养层的培养板中.达尔伯克氏必需基本培养基(Dulbecco's minimum essential medium,DMEM)培养24 h后换用角质细胞无血清培养基(keratinocyte serum-free medium,K-SFM)继续培养,部分细胞72 h后行成骨、成脂诱导和改良型Kaplow碱性磷酸酶(alkaline phosphatase,ALP)染色鉴定;部分细胞继续培养5 d后,消化转移至Ⅳ型胶原预包被的培养板中,加入黏膜干细胞培养基培养,观察细胞克隆形成和成骨、成脂诱导、兔抗鼠角蛋白和ALP染色结果.结果 初次分离的上皮细胞群83.96