目的探讨信号传导与转录活化因子3(signal transducer and activator of transcription 3, STAT-3)的小分子抑制剂WP1066影响人舌鳞状细胞癌细胞系Tscca增殖与凋亡的分子机制。方法实验共分3组:空白对照组、二甲基亚砜组( DMSO组)、小分子抑制剂组( WP1066组)。采用WP1066拮抗磷酸化STAT-3( p-STAT-3)表达;实时定量PCR 检测加入DMSO、WP1066后微RNA-21表达;甲基噻唑基四唑( methyl thiazolyl tatrozolium ,MTT)法检测细胞生存率;流式细胞术测细胞早期凋亡;蛋白质印迹法检测 STAT-3及 p-STAT-3、细胞程序死亡蛋白4( programmed cell death protein 4, PDCD-4)、细胞增殖核抗原(antigen 67,Ki-67)、B细胞淋巴瘤2(B cell lymphoma 2,Bcl-2)、活化型含半胱氨酸的天冬氨酸蛋白水解酶3(cleaved cysteinyl aspartate specific proteinase-3,CCASP-3)的表达;荧光素酶报告基因实验验证STAT-3对微RNA-21调控。建立Tscca裸鼠皮下荷瘤模型,通过免疫组织化学染色及原位末端标记( terminal deoxynucleoitidyl transferase mediated nick end labeling ,TUNEL)法评价WP1066对细胞增殖、凋亡的作用。结果 WP1066组中STAT-3/p-STAT-3蛋白表达降低( STAT-3:F=15.336,P =0.004;p-ST
作者:黄媛媛;周旋;刘爱芹;李莎莎;王旭东;张仑
来源:中华口腔医学杂志 2014 年 5期