目的 研究尼古丁诱导口腔癌前病变细胞中E26转录因子1(E26 transformation specific 1,Ets1)与过氧化物还原酶1(peroxiredoxin 1,Prx1)的相互作用,探讨尼古丁在口腔癌前病变中作用的分子机制.方法 培养口腔癌前病变细胞株(dysplastic oral keratinocyte,DOK),实验分为尼古丁组、对照组、敲低组和敲低对照组,尼古丁组、敲低组和敲低对照组DOK细胞用1μmol/L尼古丁处理7d,对照组不作任何处理.分别采用蛋白质印迹法、免疫共沉淀(co-immunoprecipitation,Co-IP)和染色质免疫共沉淀(chromatin immunoprecipitation,ChIP)法检测尼古丁组和对照组DOK细胞中Prx1和Ets1的蛋白表达量、Prx1和Ets1蛋白结合量以及Ets1与过氧化物还原酶1基因(PRDX1)启动子区的结合情况.分别利用siRNA干扰和慢病毒感染技术敲低Ets1和Prx1,蛋白质印迹法检测敲低组和敲低对照组DOK细胞中Prx1和Ets1的蛋白表达变化.结果 尼古丁诱导Prx1和Ets1蛋白表达显著增加,尼古丁组Prx1和Ets1蛋白相对表达量分别为0.71±0.02和0.12±0.01,均显著高于对照组中二者的表达(Prx1和Ets1蛋白分别为0.53±0.06和0.01±0.01,P=0.009,P=0.000).Co-IP结果显示,Prx1能与Ets1形成蛋白复合体,尼古丁组Prx1和Ets1蛋白结合量高于对照组.ChIP检测发现,尼古丁可显著上调E
作者:齐墨词;陈慧;王立平;张敏;汤晓飞
来源:中华口腔医学杂志 2017 年 52卷 12期