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目的 探讨超表达Notch胞内结构域(Notch intracellular domain,NICD)对人牙周膜干细胞(human periodontal ligament stem cells,hPDLSC)增殖和成骨分化的影响,为牙周病骨缺损的治疗提供依据.方法 以第3代稳定超表达NICD的hPDLSC为实验组,以正常hPDLSC为阴性对照组,转染空载体的hPDLSC为空白对照组,通过细胞计数试剂盒(cell counting kit-8,CCK-8)检测超表达NICD对hPDLSC增殖能力的影响;通过茜素红染色和实时荧光定量PCR (real-time quantitative PCR,qPCR)检测超表达NICD对hPDLSC成骨相关基因:牙骨质附着蛋白(cementum attachment proteins,CAP)、骨钙蛋白、Runt相关转录因子2(Runt-related transcription factor 2,RUNX2),Notch信号通路受体Notch1的影响;通过蛋白质免疫印迹法检测超表达NICD对hPDLSC成骨蛋白RUNX2和flag标记蛋白(用以标记NICD)的影响.结果 CCK-8结果显示,3组1~2 d的A值相比差异均无统计学意义(P>0.05);实验组3~7 d的细胞数量(A值分别为0.203±0.016、0.364±0.014、0.449±0.020、0.549±0.020及0.570±0.020)与其他两组相比显著增加(P<0.05).茜素红染色结果示,与空白对照组及阴性对照组相比,实验组染色的矿化结节形成范围小颜色浅;qPCR结果显示,实验组14及21 d CAP基因表达量(0.75

作者:邱申彩;龙晏;陈晓燕;舍玉秀;吴佩玲

来源:中华口腔医学杂志 2019 年 54卷 5期

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作者:
邱申彩;龙晏;陈晓燕;舍玉秀;吴佩玲
来源:
中华口腔医学杂志 2019 年 54卷 5期
标签:
细胞增殖 超表达 Notch胞内结构域 人牙周膜干细胞 成骨分化 Cell proliferation Overexpression Notch intracellular domain Human periodontal ligament stem cells Osteogenic differentiation
目的 探讨超表达Notch胞内结构域(Notch intracellular domain,NICD)对人牙周膜干细胞(human periodontal ligament stem cells,hPDLSC)增殖和成骨分化的影响,为牙周病骨缺损的治疗提供依据.方法 以第3代稳定超表达NICD的hPDLSC为实验组,以正常hPDLSC为阴性对照组,转染空载体的hPDLSC为空白对照组,通过细胞计数试剂盒(cell counting kit-8,CCK-8)检测超表达NICD对hPDLSC增殖能力的影响;通过茜素红染色和实时荧光定量PCR (real-time quantitative PCR,qPCR)检测超表达NICD对hPDLSC成骨相关基因:牙骨质附着蛋白(cementum attachment proteins,CAP)、骨钙蛋白、Runt相关转录因子2(Runt-related transcription factor 2,RUNX2),Notch信号通路受体Notch1的影响;通过蛋白质免疫印迹法检测超表达NICD对hPDLSC成骨蛋白RUNX2和flag标记蛋白(用以标记NICD)的影响.结果 CCK-8结果显示,3组1~2 d的A值相比差异均无统计学意义(P>0.05);实验组3~7 d的细胞数量(A值分别为0.203±0.016、0.364±0.014、0.449±0.020、0.549±0.020及0.570±0.020)与其他两组相比显著增加(P<0.05).茜素红染色结果示,与空白对照组及阴性对照组相比,实验组染色的矿化结节形成范围小颜色浅;qPCR结果显示,实验组14及21 d CAP基因表达量(0.75