目的：设计并化学合成针对ski的siRNA分子片段，转染人视网膜色素上皮（hRPE）细胞抑制ski表达，观察其对hRPE细胞增生和迁移等生物学功能方面的影响。方法设计并化学合成3对针对人ski mRNA(NM_003036)中910、1912和389靶位的siRNAs，以脂质体方法转染hRPE细胞，运用RT-PCR法和Western印迹法检测细胞中ski基因在mRNA水平和蛋白水平的变化。然后利用MTT法和Transwell模型检测转染ski-siRNA的hRPE细胞增生活力和迁移能力等生物学功能方面指标的变化。结果 RT-PCR和Western印迹检测结果证实3条ski-siRNA转染48 h后，均不同程度降低了hRPE细胞中ski基因的mRNA和蛋白表达水平(P＜0.05)，其中siRNA-C的干扰效果最强，与阴性对照相比抑制率达到45
作者：郭斌；刘晓娟；王莉；范钦华
来源：中华临床医师杂志（电子版） 2013 年 15期
