目的:探讨炎性细胞因子IL-1β、IFN-γ对小鼠原代胰岛葡萄糖刺激下胰岛素分泌功能的影响。方法(1)经胰腺表面多点注射灌注胶原酶消化,不连续密度梯度离心法分离、纯化小鼠胰岛。分离后胰岛培养48 h后换用无糖KRB缓冲液培养30 min,分别于含0、2.8、22.2 mmol/L葡萄糖的KRB缓冲液中孵育60 min,放射免疫法检测上清液中胰岛素浓度(GSIS);(2)小鼠胰岛分别加入不同浓度的IL-1β(0.25 ng/ml、2.5 ng/ml)和(或)IFN-γ(100 U/ml、1000 U/ml),24 h换无糖KRB缓冲液培养30 min,于含22.2 mmol/L葡萄糖的KRB缓冲液中孵育1 h,放射免疫法检测细胞上清液中胰岛素浓度;(3)采用SPSS 11.5对数据进行分析,多组间比较采用方差分析,两组间比较采用t检验,以P<0.05为有统计学差异。结果(1)与无葡萄糖刺激组相比,小鼠胰岛在22.2 mmol/L葡萄糖刺激时胰岛素分泌达高峰[(142.48±1.22)μIU/ml vs.(40.61±0.74)μIU/ml,t=-123.669,P<0.001];2.8 mmol/L葡萄糖刺激时胰岛素分泌较22.2 mmol/L葡萄糖刺激时下降;(2)与单纯22.2 mmol/L葡萄糖刺激组相比,IL-1β(0.25 ng/ml)组[(113.83±5.65)μIU/ml vs.(142.48±1.22)μIU/ml,t=8.759,P<0.05]、IL-1β(2.5 ng/ml)组[(91.01±2.62)
作者:合湫;苏恒;李超;沈涛;薛元明;严新民
来源:中华临床医师杂志(电子版) 2013 年 24期