目的：建立稳定、重复性好的小鼠心房肌细胞分离技术，观察小鼠心房肌细胞形态以及钾通道电流特性，为进一步研究小鼠心房肌细胞的电生理特性打下基础。方法在体视显微镜下行主动脉插管，应用Langendorff装置恒流灌流，依次用无钙台氏液、酶消化液（含Ⅱ型胶原酶和胰蛋白酶）灌流，灌流完成后，剪除心室组织，心房组织块用消化酶液（仅含Ⅱ型胶原酶）行二步消化，分离出小鼠单个心房肌细胞，采用标准的全细胞膜片钳技术记录动作电位和钾电流，电流的电压-电流曲线（I-V曲线）以电压为横坐标，每个电压值下的电流密度（pA/pF）为纵坐标拟合而成。结果本法分离所得小鼠心房肌细胞呈长梭形、横纹清晰，细胞耐钙，具有正常电生理活性，细胞贴壁好，从而易于形成高阻封接；记录小鼠心房肌细胞动作电位为近似于三角形，静息电位为（-70.2±4.9）mV；记录的瞬时外向钾电流（Ito）激活非常快，达峰值后快速失活，峰电流存在明显的电压依赖性和外向整流特征，电流峰值为（11.1±1.9）pA/pF；超速激活的延迟整流钾电流（IKur）激活迅速，几乎无延迟现象，失活缓慢，峰电流呈现出外向整流特征，该电流约在-20 mV被激活，峰电流存在明显的电压依赖性，峰值（7.0±1.5）pA/pF。内向整流钾电流（IK1）随着超极化刺激电
作者：王娟；杨艳敏；李泱；朱俊；傅义程；邵兴慧
来源：中华临床医师杂志（电子版） 2014 年 9期
