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目的:探讨凋亡抑制蛋白(Survivin)对非小细胞肺癌(NSCLC)H1299细胞株的生物学影响。方法通过脂质体介导将 Survivin 基因 siRNA 瞬时转染 H1299细胞。采用 RT-PCR及Western blot 检测转染后H1299细胞内Survivin 基因的表达水平。MTT比色法、流式细胞术(FCM)及Western blot观察细胞增殖、凋亡、周期及Caspase-9蛋白表达变化情况。结果 RT-PCR及Western blot证实,siRNA沉默的H1299细胞中Survivin mRNA、蛋白的表达水平较未转染组明显降低(t=10.970,P=0.000;t=9.192,P=0.003)。MTT、细胞凋亡及周期结果表明,siRNA 沉默的 H1299细胞其增殖能力明显减弱、细胞凋亡明显升高,G2/M期阻滞,Caspase-9蛋白表达增加(t=8.162, P=0.001;t=10.800,P=0.000;t=9.192,P=0.003)。结论 Survivin参与NSCLC细胞增殖、凋亡、周期这一生物学过程。

作者:翟宏芳;崔大为;盛树海;孙国贵

来源:中华临床医师杂志(电子版) 2014 年 10期

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作者:
翟宏芳;崔大为;盛树海;孙国贵
来源:
中华临床医师杂志(电子版) 2014 年 10期
标签:
癌,非小细胞肺 反转录聚合酶链反应 印迹法,蛋白质 免疫组织化学 Survivin Carcinoma,non-small-cell lung Reverse transcriptase polymerase chain reaction Blotting,Western Immunohistochemistry Survivin
目的:探讨凋亡抑制蛋白(Survivin)对非小细胞肺癌(NSCLC)H1299细胞株的生物学影响。方法通过脂质体介导将 Survivin 基因 siRNA 瞬时转染 H1299细胞。采用 RT-PCR及Western blot 检测转染后H1299细胞内Survivin 基因的表达水平。MTT比色法、流式细胞术(FCM)及Western blot观察细胞增殖、凋亡、周期及Caspase-9蛋白表达变化情况。结果 RT-PCR及Western blot证实,siRNA沉默的H1299细胞中Survivin mRNA、蛋白的表达水平较未转染组明显降低(t=10.970,P=0.000;t=9.192,P=0.003)。MTT、细胞凋亡及周期结果表明,siRNA 沉默的 H1299细胞其增殖能力明显减弱、细胞凋亡明显升高,G2/M期阻滞,Caspase-9蛋白表达增加(t=8.162, P=0.001;t=10.800,P=0.000;t=9.192,P=0.003)。结论 Survivin参与NSCLC细胞增殖、凋亡、周期这一生物学过程。