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目的:将外源基因 pSurvivin-HSV-TK 导入质粒 PBI-CMV2中,将外源基因pAFP-HSV-TK导入质粒PBI-CMV2中,构建两种特异性表达的质粒,比较两种启动子调停的优越性。方法由阳离子脂质体 lipofectamine2000TM,运载两种质粒转染肝癌细胞 HuH-7,流式细胞术测定转染效率,半定量PCR检测TK基因在肝癌细胞中的表达水平。转染肝癌细胞HuH-7,联合更昔洛韦杀伤细胞,流式细胞术检测细胞凋亡率,CCK-8检测加药(GCV)后细胞的增殖情况。结果阳离子脂质体lipofectamine2000TM介导Survivin-TK-pBI-CMV2质粒转染的HuH-7细胞的转染率与介导AFP-TK-pBI-CMV2质粒转染的 HuH-7细胞的转染率分别为(14.43±0.88)

作者:赵娜;李勇芳;张英敏;孟凡秀;张琪;高然朋;张悦红;于保锋;郭睿;解军;徐钧

来源:中华临床医师杂志(电子版) 2016 年 10卷 11期

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作者:
赵娜;李勇芳;张英敏;孟凡秀;张琪;高然朋;张悦红;于保锋;郭睿;解军;徐钧
来源:
中华临床医师杂志(电子版) 2016 年 10卷 11期
标签:
肝癌细胞 Lipofectamine2000 AFP启动子 Survivin启动子 HSVtk 更昔洛韦 基因治疗 重组基因载体? Hepatoma cell Lipofectamine2000 AFP promoter Survivin promoter HSVtk Ganciclovir Gene therapy Recombinant gene vector
目的:将外源基因 pSurvivin-HSV-TK 导入质粒 PBI-CMV2中,将外源基因pAFP-HSV-TK导入质粒PBI-CMV2中,构建两种特异性表达的质粒,比较两种启动子调停的优越性。方法由阳离子脂质体 lipofectamine2000TM,运载两种质粒转染肝癌细胞 HuH-7,流式细胞术测定转染效率,半定量PCR检测TK基因在肝癌细胞中的表达水平。转染肝癌细胞HuH-7,联合更昔洛韦杀伤细胞,流式细胞术检测细胞凋亡率,CCK-8检测加药(GCV)后细胞的增殖情况。结果阳离子脂质体lipofectamine2000TM介导Survivin-TK-pBI-CMV2质粒转染的HuH-7细胞的转染率与介导AFP-TK-pBI-CMV2质粒转染的 HuH-7细胞的转染率分别为(14.43±0.88)