目的 探讨铜蓝蛋白(Ceruloplasmin,Cp)在石英诱导的人胚肺成纤维细胞(HELF)中PI3K/PTEN信号通路改变中的作用.方法 建立稳定转染空载体pGenesil1.1的HELF细胞及pGenesil 1.1与shRNA PTEN质粒共转染的HELF细胞(简称PT),复苏转染p85显性失活突变体质粒的HELF细胞(简称DN-p85).实验中石英浓度为100 μg/ml,Cp浓度为10、20、30 μg/ml,Cp在石英作用1h后加入.在HELF、PT和DN-p85 3个不同细胞系中,分别设立对照组、石英染毒组、石英+不同浓度Cp组.用噻唑蓝(MTT)比色法观察分别抑制PTEN和p85后,Cp对石英诱导的HELF细胞增殖的影响.蛋白免疫印迹(Western blot)实验检测PTEN、p85、p110、AKT及AKT308位点和AKT473位点磷酸化水平、总ERK、JNK及其磷酸化水平的变化.结果 抑制PTEN后,100 μgml石英与30 μg/ml Cp共同诱导的p85蛋白水平增加被明显抑制(P＜0.05),p110蛋白水平无变化(P＞0.05).抑制p85后,石英以及石英+不同浓度Cp诱导的细胞增殖加快被抑制;100 μg/ml石英与30 μg/ml Cp共同诱导的AKT308位及AKT473位磷酸化水平、总ERK、磷酸化ERK和磷酸化JNK水平的增加低于相应的对照组(P＜0.05),但是总JNK水平的变化没有统计学差异(P＞0.05).结论 Cp通过PI3K/AKT/MAPK信号通路参与石英诱导的HELF细胞增殖,PTEN可以影响P

作者：张夏男；李跃纲；贾效伟；刘秉慈；叶萌

来源：中华劳动卫生职业病杂志 2014 年 32卷 4期