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目的 探讨转化生长因子(TGF-β1)是否可通过活性氧(ROS)激活c-Jun末端激酶(JNK)通路,刺激肺成纤维细胞增殖和Ⅰ/Ⅲ型胶原合成增加,促进矽肺纤维化形成.方法 在检测TGF-β1对肺成纤维细胞作用的实验中,肺成纤维细胞分为对照组(0.4%血清)和TGF-β1组(5μg/L).在检测抗氧化剂NAC(N-乙酰-L-半胱氨酸)是否抑制了TGF-β1对肺成纤维细胞作用的实验中,肺成纤维细胞分为对照组(0.4%血清)、H2O2组(0.1mmol/L,阳性对照)、H2O2+NAC组(10 mmol/L)、TGF-β1组(5μg/L)、TGF-β1+NAC组.利用MTT法测定细胞增殖,蛋白免疫印迹法(western blot)测定Ⅰ/Ⅲ型胶原及JNK表达,免疫荧光法检测8-羟化脱氧鸟苷(8-OHdG,一种DNA氧化产物)水平.结果 在检测TGF-β1对肺成纤维细胞作用的实验中,与对照组比较,TGF-β1组肺成纤维细胞增殖增强、Ⅰ/Ⅲ型胶原、JNK磷酸化及8-OHdG水平增高,差异有统计学意义(P<0.05).在检测NAC是否抑制了TGF-β1对肺成纤维细胞作用的实验中,与对照组比较,H2O2组和TGF-β1组细胞增殖的吸光度值,Ⅰ/Ⅲ型胶原及JNR磷酸化、8-OHdG水平均增高,但与H2O2组和TGF-β1组比较,H2O2+NAC组和TGF-β1+NAC组的吸光度值,Ⅰ/Ⅲ型胶原及JNR磷酸化、8-OHdG水平均表达下降,差异有统计学意义(P<0.05).结论 TGF-β1可诱导肺成纤维

作者:赵立双;魏中秋;杨方;孙影

来源:中华劳动卫生职业病杂志 2015 年 33卷 1期

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作者:
赵立双;魏中秋;杨方;孙影
来源:
中华劳动卫生职业病杂志 2015 年 33卷 1期
标签:
成纤维细胞 转化生长因子-β1 活性氧组分 胶原 Fibroblasts Transforming growth factor beta Reactive oxygen species Collagen
目的 探讨转化生长因子(TGF-β1)是否可通过活性氧(ROS)激活c-Jun末端激酶(JNK)通路,刺激肺成纤维细胞增殖和Ⅰ/Ⅲ型胶原合成增加,促进矽肺纤维化形成.方法 在检测TGF-β1对肺成纤维细胞作用的实验中,肺成纤维细胞分为对照组(0.4%血清)和TGF-β1组(5μg/L).在检测抗氧化剂NAC(N-乙酰-L-半胱氨酸)是否抑制了TGF-β1对肺成纤维细胞作用的实验中,肺成纤维细胞分为对照组(0.4%血清)、H2O2组(0.1mmol/L,阳性对照)、H2O2+NAC组(10 mmol/L)、TGF-β1组(5μg/L)、TGF-β1+NAC组.利用MTT法测定细胞增殖,蛋白免疫印迹法(western blot)测定Ⅰ/Ⅲ型胶原及JNK表达,免疫荧光法检测8-羟化脱氧鸟苷(8-OHdG,一种DNA氧化产物)水平.结果 在检测TGF-β1对肺成纤维细胞作用的实验中,与对照组比较,TGF-β1组肺成纤维细胞增殖增强、Ⅰ/Ⅲ型胶原、JNK磷酸化及8-OHdG水平增高,差异有统计学意义(P<0.05).在检测NAC是否抑制了TGF-β1对肺成纤维细胞作用的实验中,与对照组比较,H2O2组和TGF-β1组细胞增殖的吸光度值,Ⅰ/Ⅲ型胶原及JNR磷酸化、8-OHdG水平均增高,但与H2O2组和TGF-β1组比较,H2O2+NAC组和TGF-β1+NAC组的吸光度值,Ⅰ/Ⅲ型胶原及JNR磷酸化、8-OHdG水平均表达下降,差异有统计学意义(P<0.05).结论 TGF-β1可诱导肺成纤维