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目的 研究心肌注射重组腺相关病毒(rAAV)2/1介导心肌肌浆网Ca2+-ATP酶(SERCA2a)基因治疗慢性心力衰竭犬的安全性.方法 选取成年比格犬8只,随机分为对照组和SERCA2a基因转导组(转导组),每组4只.分别采用PCR、RT-PCR和Weslern blot法从DNA、RNA和蛋白水平检测rAAV2/1-SERCA2a转导后在犬体内的分布;采用双夹心ELISA法检测转导组犬的血清.结果 除注射rAAV2/1的心肌区域外,未注射rAAV2/1 的心肌区域、主要脏器、骨骼肌和性腺中均未检测到rAAV2/1 SERCA2a.对照组与转导组犬心肌、腰大肌、咀嚼肌和睾丸表现出相同的SERCA2a蛋白表达谱,未在其他组织中检测到.转导组犬血清内未检测到抗rAAV2/1 抗体.结论 rAAV2/1 介导的基因转导是相对安全的,未整合到心脏以外的其他组织,也未在犬体内引发体液免疫.

作者:付治卿;李小鹰;鲁晓春;杨广;米亚非;周声安;叶卫华

来源:中华老年心脑血管病杂志 2011 年 13卷 6期

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作者:
付治卿;李小鹰;鲁晓春;杨广;米亚非;周声安;叶卫华
来源:
中华老年心脑血管病杂志 2011 年 13卷 6期
标签:
心力衰竭 腺病毒科 肌浆网钙转运ATP酶类 基因疗法 聚合酶链反应 转染
目的 研究心肌注射重组腺相关病毒(rAAV)2/1介导心肌肌浆网Ca2+-ATP酶(SERCA2a)基因治疗慢性心力衰竭犬的安全性.方法 选取成年比格犬8只,随机分为对照组和SERCA2a基因转导组(转导组),每组4只.分别采用PCR、RT-PCR和Weslern blot法从DNA、RNA和蛋白水平检测rAAV2/1-SERCA2a转导后在犬体内的分布;采用双夹心ELISA法检测转导组犬的血清.结果 除注射rAAV2/1的心肌区域外,未注射rAAV2/1 的心肌区域、主要脏器、骨骼肌和性腺中均未检测到rAAV2/1 SERCA2a.对照组与转导组犬心肌、腰大肌、咀嚼肌和睾丸表现出相同的SERCA2a蛋白表达谱,未在其他组织中检测到.转导组犬血清内未检测到抗rAAV2/1 抗体.结论 rAAV2/1 介导的基因转导是相对安全的,未整合到心脏以外的其他组织,也未在犬体内引发体液免疫.