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目的 探讨大鼠脑缺血再灌注后P62介导的微管结合蛋白轻链3(LC3)和Kelch样ECH相关蛋白1(kelch-like ECH-associated protein 1,Keap1)表达的变化.方法 将80只SD大鼠随机分为假手术组和模型组(采用线栓法制备局灶性脑缺血大鼠模型),每组40只,分别于12h,1、2和3d取材,每个时间点10只.采用化学荧光法测定脑组织活性氧水平,透射电子显微镜观察神经细胞中自噬及凋亡形态结构变化,分别采用qRT-PCR和Westernblot法观察P62和LC3和Keap1 mRNA和蛋白在缺血半暗带表达变化.结果 与假手术组比较,模型组大鼠各时间点脑组织中活性氧水平显著升高,1d时达峰值[(238.23±25.51)% vs(134.60±12.48)%,P<0.01];透射电子显微镜下,模型组大鼠神经细胞线粒体肿胀,可见不同程度自噬小体形成,细胞发生迟发性神经元死亡.与假手术组比较,模型组各时间点P62 mRNA和蛋白表达明显下调,1d达最低值(1.915±0.711 vs1.253±0.679;0.10±0.02vs 0.16±0.04,P<0.01);各时间点LC3、Keap1 mRNA和蛋白表达显著升高,1d达到最高值(0.862±0.501 vs 1.450±0.245,1.125±0.421 vs 2.037±0.730;1.25±0.17 vs 0.36±0.07,1.35±0.14 vs 0.24±0.05,P<0.05,P<0.01).结论 大鼠脑缺血再灌注损伤后LC3和Keap1表达水平增加,而P62表达减少,诱导了细

作者:胡跃强;唐农;秦红玲;廖泰荣;李媛媛;王启芝

来源:中华老年心脑血管病杂志 2019 年 21卷 3期

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作者:
胡跃强;唐农;秦红玲;廖泰荣;李媛媛;王启芝
来源:
中华老年心脑血管病杂志 2019 年 21卷 3期
标签:
自噬 脑缺血 氧化性应激 再灌注损伤 微管相关蛋白质类
目的 探讨大鼠脑缺血再灌注后P62介导的微管结合蛋白轻链3(LC3)和Kelch样ECH相关蛋白1(kelch-like ECH-associated protein 1,Keap1)表达的变化.方法 将80只SD大鼠随机分为假手术组和模型组(采用线栓法制备局灶性脑缺血大鼠模型),每组40只,分别于12h,1、2和3d取材,每个时间点10只.采用化学荧光法测定脑组织活性氧水平,透射电子显微镜观察神经细胞中自噬及凋亡形态结构变化,分别采用qRT-PCR和Westernblot法观察P62和LC3和Keap1 mRNA和蛋白在缺血半暗带表达变化.结果 与假手术组比较,模型组大鼠各时间点脑组织中活性氧水平显著升高,1d时达峰值[(238.23±25.51)% vs(134.60±12.48)%,P<0.01];透射电子显微镜下,模型组大鼠神经细胞线粒体肿胀,可见不同程度自噬小体形成,细胞发生迟发性神经元死亡.与假手术组比较,模型组各时间点P62 mRNA和蛋白表达明显下调,1d达最低值(1.915±0.711 vs1.253±0.679;0.10±0.02vs 0.16±0.04,P<0.01);各时间点LC3、Keap1 mRNA和蛋白表达显著升高,1d达到最高值(0.862±0.501 vs 1.450±0.245,1.125±0.421 vs 2.037±0.730;1.25±0.17 vs 0.36±0.07,1.35±0.14 vs 0.24±0.05,P<0.05,P<0.01).结论 大鼠脑缺血再灌注损伤后LC3和Keap1表达水平增加,而P62表达减少,诱导了细