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目的 探讨着色性干皮病基因B(xeroderma pigmentosum B,XPB)对白介素-6(IL-6)介导人血管平滑肌细胞( VSMC)增殖及凋亡的影响.方法 用脂质体转染法将重组质粒pcDNA3.1-XPB和空载质粒pcDNA3.1稳定转染VSMC,然后给予100 U/ml的IL-6孵育48 h.实验分为6组:(1)空白对照组;(2) pcDNA3.1组;(3) pcDNA3.1-XPB组;(4)IL-6组;(5) IL-6+ pcDNA3.1组;(6)IL-6+ pcDNA3.1-XPB组.用反转录聚合酶链反应(RT-PCR)和蛋白质免疫印迹法(Western blotting)检测XPB、Bcl-2、Bax和野生型p53(wt-p53)表达量的变化;用比色法(MTT)观察细胞增殖活力;用流式细胞仪检测细胞周期和凋亡率.结果 重组质粒pcDNA3.1-XPB转染使细胞XPB表达增高(P<0.05或P<0.01),同时Bcl-2表达降低、Bax和wt-p53表达增高(P<0.05或P<0.01),抑制IL-6促进VSMC的Bcl-2高表达、Bax和wt-p53降表达(P<0.05或P<0.01);XPB高表达抑制了细胞增殖活力(q=2.95,P<0.05),并抑制IL-6促进VSMC增殖,IL-6+ pcDNA3.1-XPB组和IL-6 +pcDNA3.1组VSMC存活率分别为(102.6±6.2)%和(124.5+7.9)%(q=3.49,P<0.05);流式细胞仪检测结果显示,XPB高表达引起细胞G0/G1期增加、S期减少、凋亡率增加(q值分别为2.99、5.39、3.05,P<0.05或P<0.01),并抑制IL-6促进VSMC G0/G1期减少、S

作者:丁浩;李菊香;洪葵;孙国芳;张南;吴延庆;吴清华;程晓曙

来源:中华老年医学杂志 2011 年 30卷 10期

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作者:
丁浩;李菊香;洪葵;孙国芳;张南;吴延庆;吴清华;程晓曙
来源:
中华老年医学杂志 2011 年 30卷 10期
标签:
干皮病,着色性 肌,平滑,血管 增殖 细胞凋亡 Xeroderma pigmentosum Muscle,smooth,vascular Cell proliferation Apoptosis
目的 探讨着色性干皮病基因B(xeroderma pigmentosum B,XPB)对白介素-6(IL-6)介导人血管平滑肌细胞( VSMC)增殖及凋亡的影响.方法 用脂质体转染法将重组质粒pcDNA3.1-XPB和空载质粒pcDNA3.1稳定转染VSMC,然后给予100 U/ml的IL-6孵育48 h.实验分为6组:(1)空白对照组;(2) pcDNA3.1组;(3) pcDNA3.1-XPB组;(4)IL-6组;(5) IL-6+ pcDNA3.1组;(6)IL-6+ pcDNA3.1-XPB组.用反转录聚合酶链反应(RT-PCR)和蛋白质免疫印迹法(Western blotting)检测XPB、Bcl-2、Bax和野生型p53(wt-p53)表达量的变化;用比色法(MTT)观察细胞增殖活力;用流式细胞仪检测细胞周期和凋亡率.结果 重组质粒pcDNA3.1-XPB转染使细胞XPB表达增高(P<0.05或P<0.01),同时Bcl-2表达降低、Bax和wt-p53表达增高(P<0.05或P<0.01),抑制IL-6促进VSMC的Bcl-2高表达、Bax和wt-p53降表达(P<0.05或P<0.01);XPB高表达抑制了细胞增殖活力(q=2.95,P<0.05),并抑制IL-6促进VSMC增殖,IL-6+ pcDNA3.1-XPB组和IL-6 +pcDNA3.1组VSMC存活率分别为(102.6±6.2)%和(124.5+7.9)%(q=3.49,P<0.05);流式细胞仪检测结果显示,XPB高表达引起细胞G0/G1期增加、S期减少、凋亡率增加(q值分别为2.99、5.39、3.05,P<0.05或P<0.01),并抑制IL-6促进VSMC G0/G1期减少、S