目的 了解2007年5-6月北京市儿童中流行的手足口病的病原.方法 于2007年5、6月间采集来首都儿科研究所附属儿童医院门诊就诊的手足口病患儿咽拭子标本6份和1份病情危重的手足口病并发神经系统症状而急诊收住院患儿(编号F4243,年龄9岁8个月,女性)的经气管插管呼吸道抽吸液、脑脊液及血清标本.将咽拭子和气管插管抽吸液标本接种Hep-2、MDCK和Vero细胞进行病毒分离.同时设计位于肠道病毒5'非编码区(UTR)的通用引物2对(巢式PCR)、肠道病毒71型(EV71)VP1基因不同位置的特异性引物2对半(PCR和半巢式PCR)和柯萨奇病毒A组16型(CA16)的特异性引物1对检测标本中的病毒核酸.首先用随机引物将标本中的RNA逆转录成cDNA,然后分别用上述引物进行PCR扩增肠道病毒5'UTR和EV71/CA16的VP1基因片段;对EV71阳性的标本还扩增了VP1全基因,扩增产物直接进行序列测定和分析.结果 6例门诊就诊的普通手足口病患儿和F4243的呼吸道标本中均扩增到肠道病毒5'UTR基因片段,有2例门诊患儿和F4243的标本中还扩增到EV71的VP1基因片段,提示该组手足口病患儿均为肠道病毒感染,其中3例为EV71感染.序列测定和分析表明有1例普通手足口病患儿(F4211)和F4243标本确定为EV71.所有标本接种Hep-2和MDCK细胞均未出现病变,说明常见的呼吸道病毒为阴性.除1
作者：朱汝南；钱渊；邓洁；邢江峰；赵林清；王芳；廖斌；任晓旭；李颖；张琪；李杰
来源：中华流行病学杂志 2007 年 28卷 10期
