目的 构建梅毒螺旋体tpn17、tpn47基因及tpn17-tpn47融合基因原核表达系统,建立基于rTpN17、rTpN47和rTpN17-TpN47的ELISAs并对其用于梅毒血清学诊断的敏感性和特异性进行评价.方法 采用常规分子生物学方法扩增并克隆梅毒螺旋体tpn17和tpn47基因,以连接引物PCR构建tpn17-tpn47人工融合基因,建立上述目的 基因原核表达系统.采用SDS-PAGE检测目的 重组蛋白rTpN17、rTpN47和rTpN17-TpN47表达情况,Ni-NTA亲和层析法提纯上述目的 重组蛋白,Western blot检测其免疫性.分别以rTpN17、rTpN47和rTpN17-TpN47为包被抗原,建立相应ELISAs检测健康人群、类风湿关节炎(RA)和系统性红斑狼疮(SLE)患者及梅毒患者血清标本中梅毒抗体并与现行TRUST和TPHA进行比较.结果 克隆的tpn17、tpn47基因及构建的tpn17-tpn47融合基因与GenBank中相关序列相似性为100
作者:孙爱华;孙百莉;严杰
来源:中华流行病学杂志 2007 年 28卷 10期