目的 了解甲型副伤寒沙门菌临床菌株外膜蛋白(ompX)基因分布、序列保守性及其产物免疫原性和免疫保护性.方法 采用PCR扩增甲型副伤寒沙门菌临床菌株ompX基因.利用大肠埃希菌表达系统表达rOmpX,产物采用Ni-NTA亲和层析法提纯.采用免疫扩散法、ELISA和Western blot鉴定rOmpX抗原性和免疫反应性.采用小鼠感染模型了解rOmpX对甲型副伤寒沙门菌感染的免疫保护作用,微量肥达试验检测rOmpX免疫小鼠血清抗体凝集伤寒和副伤寒沙门菌效价.结果 所有甲型副伤寒沙门菌临床菌株均有ompX基因,其核苷酸和氨基酸序列相似性分别高达99.2%~ 100.0%和98.4%~100.0%.rOmpX免疫家兔可产生高效价抗体,利用该抗体与甲型副伤寒患者血清标本进行ELISA试验,95.6%(65/68)的标本呈阳性.100 μg和200 μug rOmpX对感染小鼠的免疫保护率分别为93.3%(14/15)和100.0%(15/15).rOmpX免疫小鼠血清对甲型副伤寒和伤寒沙门菌H抗原凝集效价为1∶10~1∶40.结论 ompX基因重组表达产物可作为甲型副伤寒沙门菌基因工程疫苗候选抗原.
作者:李明雷;方海俊;范兴丽;张佳;严杰;孙爱华
来源:中华流行病学杂志 2013 年 34卷 12期