目的探讨辐射诱导基因调控元件Egr-1调控的潮霉素磷酸转移酶和单纯疱疹病毒胸苷激酶(HSV-TK)融合基因(hytk)对体外膀胱癌细胞的杀伤作用. 方法采用重组DNA技术构建携带Egr-1调控序列的hytk基因表达载体,应用FuGENETM6系统转染膀胱癌细胞株EJ并检测hytk基因在辐射作用下的表达及联合更昔洛韦(GCV)对膀胱癌细胞的杀伤作用. 结果成功获得带Egr-1启动子的真核表达载体pCIneo/Egr-1-hytk,经FuGENETM6系统转染后经RT-PCR、Western Blot检测示hytk基因成功整合入EJ细胞中并在mRNA、蛋白质水平获得表达,辐射后24 h的转基因细胞hytk含量较照射前明显增高(P<0.05);辐射和GCV联合作用的转基因细胞杀伤率明显高于单纯GCV作用. 结论含有Egr-1启动子的hytk真核表达载体是膀胱癌基因治疗中新型、理想的候选载体之一.
作者：张芳林；叶传忠；赵旭东
来源：中华泌尿外科杂志 2003 年 24卷 7期
