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目的 探讨膜联蛋白(Annexin) A2表达下调在前列腺癌侵袭、转移中的作用机制.方法 2010年1月至2012年6月我们采用蛋白质印迹法检测较高转移潜能的前列腺癌细胞C4-2B、较低转移潜能的前列腺癌细胞LNCaP和PC3中Annexin A2表达水平.siRNA技术干扰前列腺癌PC3细胞中Annexin A2表达后,噻唑盐(MTT)法检测细胞增殖情况,流式细胞技术检测细胞凋亡情况,蛋白质印迹法检测基质金属蛋白酶(MMP)-2、MMP-9表达水平的变化,Transwell小室和划痕实验检测前列腺癌PC3细胞体外侵袭能力及迁移能力的变化. 结果 C4-2B细胞中Annexin A2表达水平与内参比较的相对灰度值为0.22,明显低于LNCaP和PC3细胞的0.93和0.95,差异有统计学意义(P<0.01).将脂质体、Annexin A2的siRNA干扰载体质粒和对照载体质粒分别转染到PC3细胞株,构建3个细胞株:PC3-Lip、PC3-Control Vector、PC3-ANXA2-siRNA.采用siRNA技术干扰Annexin A2表达后,MTT法检测PC3-ANXA2-siRNA细胞生长速度快于PC3、PC3-Lip、PC3-Control Vector细胞,差异有统计学意义(P<0.05).流式细胞仪检测PC3-ANXA2-siRNA细胞的凋亡率为(6.2±2.6)%,与PC3的(2.3士1.9)%、PC3-Lip的(2.1±2.0)%、PC3-Control Vector的(2.0±1.8)%比较差异无统计学意义(P>0.05).蛋白质印迹法检测PC3-ANX

作者:丁滔;郑江花;洪斌;何春峰

来源:中华泌尿外科杂志 2013 年 34卷 12期

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作者:
丁滔;郑江花;洪斌;何春峰
来源:
中华泌尿外科杂志 2013 年 34卷 12期
标签:
前列腺癌 膜联蛋白A2 侵袭转移 基质金属蛋白酶类 Prostate cancer Annexin A2 Progression Matrix metalloproteinases
目的 探讨膜联蛋白(Annexin) A2表达下调在前列腺癌侵袭、转移中的作用机制.方法 2010年1月至2012年6月我们采用蛋白质印迹法检测较高转移潜能的前列腺癌细胞C4-2B、较低转移潜能的前列腺癌细胞LNCaP和PC3中Annexin A2表达水平.siRNA技术干扰前列腺癌PC3细胞中Annexin A2表达后,噻唑盐(MTT)法检测细胞增殖情况,流式细胞技术检测细胞凋亡情况,蛋白质印迹法检测基质金属蛋白酶(MMP)-2、MMP-9表达水平的变化,Transwell小室和划痕实验检测前列腺癌PC3细胞体外侵袭能力及迁移能力的变化. 结果 C4-2B细胞中Annexin A2表达水平与内参比较的相对灰度值为0.22,明显低于LNCaP和PC3细胞的0.93和0.95,差异有统计学意义(P<0.01).将脂质体、Annexin A2的siRNA干扰载体质粒和对照载体质粒分别转染到PC3细胞株,构建3个细胞株:PC3-Lip、PC3-Control Vector、PC3-ANXA2-siRNA.采用siRNA技术干扰Annexin A2表达后,MTT法检测PC3-ANXA2-siRNA细胞生长速度快于PC3、PC3-Lip、PC3-Control Vector细胞,差异有统计学意义(P<0.05).流式细胞仪检测PC3-ANXA2-siRNA细胞的凋亡率为(6.2±2.6)%,与PC3的(2.3士1.9)%、PC3-Lip的(2.1±2.0)%、PC3-Control Vector的(2.0±1.8)%比较差异无统计学意义(P>0.05).蛋白质印迹法检测PC3-ANX