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目的 评价磷酸二酯酶(PDE)4B蛋白在神经病理性痛大鼠脊髓炎症反应中的作用及其与ERK的关系.方法 健康雄性SD大鼠60只,体重180 ~ 220 g,先行L5,6鞘内置管,第6天确定导管位置后,采用随机数字表法分为5组(n=12):假手术组(Sham组)、生理盐水组(NS组)、单纯载体组(Ⅴ组)、错配siRNA组(siR-M组)及PDE4B-siRNA组(siR-B组).结扎L5脊神经制备大鼠神经病理性痛模型.于结扎后即刻、第1、3、5、7天各组分别鞘内注射10 μl生理盐水、10μl生理盐水、Lipofecta-minTM RNAiMAX、错配siRNA和LipofectaminTM RNAiMAX包裹的PDE4B-siRNA(2 μg/10μl).术前1d及术后第2、4、6和8天分别测定大鼠机械痛阈;术后第8天行为学测试结束后处死大鼠取腰段脊髓,采用Western bolt法检测PDE4B、细胞外调节蛋白激酶(ERK)、磷酸化ERK(p-ERK)的蛋白表达,ELISA法测定TNF-α、IL-1β和IL-6水平.结果 与Sham组比较,NS组、Ⅴ组、siR-M组和siR-B组术后2、4、6和8d时机械痛阈降低(P<0.05),Ⅴ组和siR-M组术后2、4、6和8d时机械痛阈差异无统计学意义(P>0.05),脊髓p-ERK、PDE4B蛋白、TNF-α、IL-1β和IL-6水平升高(P<0.05);与NS组相比,siR-B组术后2、4、6和8d时机械痛阈升高,脊髓p-ERK、PDE4B蛋白、TNF-α、IL-1β和IL-6水平降低(P<0.05),Ⅴ组

作者:底妍;李伟彦;和晓韵;李永乐;刘清珍;刘健;嵇晴

来源:中华麻醉学杂志 2013 年 33卷 5期

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作者:
底妍;李伟彦;和晓韵;李永乐;刘清珍;刘健;嵇晴
来源:
中华麻醉学杂志 2013 年 33卷 5期
标签:
环核苷酸磷酸二酯酶类,4型 脊髓 神经痛 炎症 环核苷酸调节蛋白激酶类 Cyclic nucleotide phosphodiesterases,type 4 Spinal cord Neuralgia Inflammation Cyclic nucleotide-regulated protein kinases
目的 评价磷酸二酯酶(PDE)4B蛋白在神经病理性痛大鼠脊髓炎症反应中的作用及其与ERK的关系.方法 健康雄性SD大鼠60只,体重180 ~ 220 g,先行L5,6鞘内置管,第6天确定导管位置后,采用随机数字表法分为5组(n=12):假手术组(Sham组)、生理盐水组(NS组)、单纯载体组(Ⅴ组)、错配siRNA组(siR-M组)及PDE4B-siRNA组(siR-B组).结扎L5脊神经制备大鼠神经病理性痛模型.于结扎后即刻、第1、3、5、7天各组分别鞘内注射10 μl生理盐水、10μl生理盐水、Lipofecta-minTM RNAiMAX、错配siRNA和LipofectaminTM RNAiMAX包裹的PDE4B-siRNA(2 μg/10μl).术前1d及术后第2、4、6和8天分别测定大鼠机械痛阈;术后第8天行为学测试结束后处死大鼠取腰段脊髓,采用Western bolt法检测PDE4B、细胞外调节蛋白激酶(ERK)、磷酸化ERK(p-ERK)的蛋白表达,ELISA法测定TNF-α、IL-1β和IL-6水平.结果 与Sham组比较,NS组、Ⅴ组、siR-M组和siR-B组术后2、4、6和8d时机械痛阈降低(P<0.05),Ⅴ组和siR-M组术后2、4、6和8d时机械痛阈差异无统计学意义(P>0.05),脊髓p-ERK、PDE4B蛋白、TNF-α、IL-1β和IL-6水平升高(P<0.05);与NS组相比,siR-B组术后2、4、6和8d时机械痛阈升高,脊髓p-ERK、PDE4B蛋白、TNF-α、IL-1β和IL-6水平降低(P<0.05),Ⅴ组