目的 评价线粒体分裂在大鼠海马神经元缺氧复氧损伤中的作用.方法 选择出生24 h内的SD大鼠,原代培养海马神经元,以7×105/ml的细胞密度接种到25 mm×25 mm培养瓶中,采用随机数字表法,将其分为3组(n=18):对照组(C组)细胞不进行任何处理；细胞缺氧复氧组(I/R组)细胞在缺氧前加入赋形剂[二甲基亚砜(DMSO),终浓度＜0.1％]孵育40 min;线粒体分裂抑制剂组(M组)细胞在缺氧前加入50 μmol/L线粒体分裂抑制剂(溶于DMSO,DMSO浓度＜0.1％)孵育40 min.采用氧糖剥夺法建立大鼠海马神经元缺氧复氧模型,缺氧6h复氧20 h后用ELISA法检测活性氧(ROS)水平、用流式细胞仪检测细胞凋亡情况,Western blot法检测线粒体分裂蛋白、Bcl-2和Bax蛋白的表达水平,并计算Bcl-/Bax蛋白比值.结果 与C组比较,I/R组海马神经元ROS含量、细胞凋亡率升高,线粒体分裂蛋白和Bax蛋白的表达上调,而Bcl-2蛋白表达下调,Bcl-2/Bax蛋白比值降低(P＜0.05).与I/R组比较,M组海马神经元ROS含量、细胞凋亡率降低、线粒体分裂蛋白和Bax蛋白的表达下调,Bcl-2蛋白表达上调,Bcl-2/Bax蛋白比值升高(P＜0.05).结论 线粒体分裂可通过线粒体介导的凋亡通路参与大鼠海马神经元缺氧复氧损伤.
作者：王金英；王士雷；李瑜；梁楠；于金花；宋作艳；赵兰涛
来源：中华麻醉学杂志 2014 年 34卷 1期
