目的 评价不同浓度PNU282987对大鼠心肌细胞缺氧/复氧损伤的影响.方法 新生大鼠,分离纯化心肌细胞,培养72 h时,以5×105个/ml的密度接种于6孔板中(2 ml/孔),108个培养孔,采用随机数字表法,分为6组(n=18):正常对照组(C组)、缺氧/复氧组(A/R组)、3、10、30、60μmol/L PNU282987组(P3组、P10组、P30组和P60组).采用缺氧6h复氧6h的方法制备心肌细胞缺氧/复氧损伤模型,P3组、P10组、P30组和P60组复氧时分别加入相应浓度的PNU282987.采用比色法检测心肌细胞乳酸脱氢酶(LDH)漏出水平,采用膜联蛋白V/碘化丙啶双染流式细胞术检测心肌细胞凋亡情况,采用ELISA法检测培养上清液白细胞介素-6(IL-6)和肿瘤坏死因子-α(TNF-α)的浓度.结果 与C组比较,A/R组、P3组、P10组、P30组和P60组心肌细胞LDH漏出率、早期细胞凋亡率和晚期细胞凋亡率升高,培养上清液IL-6和TNF-α的浓度升高(P<0.01);与A/R组比较,P3组、P10组、P30组和P60组心肌细胞LDH漏出率和早期细胞凋亡率降低,P30组最明显,培养上清液IL-6和TNF-α的浓度降低,且呈浓度依赖性(P<0.05或0.01),P3组、P10组、P30组和P60组晚期细胞凋亡率差异无统计学意义(P>0.05).结论 3、10、30、60 μmol/L PNU282987可减轻大鼠心肌细胞缺氧/复氧损伤,而30μmol/L时效果最明显.|
作者:程怡;薛富善;崔昕龙;王世玉;李瑞萍;刘高谱;杨桂珍;廖旭;刘建华
来源:中华麻醉学杂志 2015 年 35卷 7期