目的 评价1-磷脂酰肌醇3-激酶(PI3K)信号通路在神经生长因子β(NGF-β)减轻大鼠心肌细胞缺氧/复氧时内质网应激性细胞凋亡中的作用.方法 H9c2细胞株,以5× 105个/ml的密度接种于96孔板(100μl/孔).采用随机数字表法,将培养孔分为5组(n=15):正常对照组(C组)、缺氧/复氧组(H/R组)、NGF-β组(N组)、NGF-β+ NGF-β受体trkA拮抗剂K252a组(N+K组)和NGF-β+PI3K抑制剂LY294002组(N+L组).H/R组、N组、N+K组和N+L组接种于无氧培养基,在95％ N2-5％CO2无氧培养箱内孵育4h,然后在有氧培养基中培养4 h;N组、N+K组和N+L组复氧的同时分别用含NGF-β、NGF-β与K252a的混合液和NGF-β与LY294002混合液的有氧培养基孵育,NGF-β、K252a和LY294002的终浓度分别为50 ng/ml、100 nmol/L和50 μmol/L.采用CCK-8法测定细胞存活率,采用流式细胞术测定细胞凋亡率,采用Western blot法检测葡萄糖调节蛋白78(GRP78)、C/EBP同源蛋白(CHOP)、caspase-12、Akt、磷酸化丝氨酸苏氨酸蛋白激酶(p-Akt)的表达水平,并计算p-Akt与Akt表达的比值(p-Akt/Akt).结果 与C组比较,H/R组和N组细胞存活率降低,细胞凋亡率升高,H/R组GRP78、CHOP和caspase-12的表达上调,N组p-Akt/Akt升高(P＜0.05);与H/R组比较,N组细胞存活率升高,细胞凋亡率降低,GRP78、CH

作者：魏珂；谢飞；刘力；罗洁；闵苏

来源：中华麻醉学杂志 2015 年 35卷 11期