目的 评价激活腺苷酸活化蛋白激酶(AMPK)对老龄小鼠脓毒症的影响及其与自噬的关系.方法 实验Ⅰ 雌性SPF级C57BL/6小鼠28只,16～19月龄,体重25～ 35 g,采用随机数字表法分为2组(n=14):脓毒症(S组)和脓毒症+AMPK激动剂AICAR组(S+A组).S+A组给予0.5 ml AICAR灌胃,用5％二甲基亚砜溶解,S组给予5％二甲基亚砜0.5 ml灌胃,连续灌胃7d,1次/d.记录给药前后体重.给药结束后腹腔注射小鼠盲肠内容物浆液200μl建立脓毒症模型.每组取9只小鼠,造模后观察7d,记录生存情况.于造模后24 h时,每组处死5只小鼠,取脾脏组织,采用Western blot法检测AMPK、磷酸化AMPK(p-AMPK)、微管相关蛋白轻链3 Ⅰ(LC3 Ⅰ)和LC3Ⅱ的表达水平,计算p-AMPK/AMPK比值和LC3Ⅱ/LC3 Ⅰ比值.实验Ⅱ 雌性SPF级C57BL/6小鼠10只,16～19月龄,体重25～35 g.取5只小鼠,提取并培养原代腹腔巨噬细胞,采用随机数字表法分为2组(n=5):对照组(C组)和EGFP E.Coli组(E组).余下5只小鼠给予0.5 ml AICAR灌胃7d,1次/d.灌胃结束后提取并培养原代腹腔巨噬细胞,采用随机数字表法分为2组(n=5):AICAR+EG-FPE.Coli组(A+E组)和AICAR+自噬抑制剂3-甲基腺苷(3-MA) +EGFPE.Coli组(A+M+E组).A+M+E组先加入5 mmol/L 3-MA 100μl孵育1h;然后E组、A+E组和A+E+M组加入表达EGFP的E.Coli.5

作者：张钰；路佳；熊君宇

来源：中华麻醉学杂志 2019 年 39卷 5期