您的账号已在其他设备登录,您当前账号已强迫下线,
如非您本人操作,建议您在会员中心进行密码修改

确定
收藏 | 浏览89 | 下载64

目的 评价长链非编码RNA母系表达基因3(MEG3)在高糖诱发大鼠神经细胞损伤中的作用及其与线粒体途径凋亡的关系.方法 正常培养PC12细胞,采用随机数字表法分为5组(n=18):正常浓度葡萄糖对照组(C组):用含25 mmol∕L葡萄糖的培养基培养;正常浓度葡萄糖+MEG3组(C+MEG3组):MEG3慢病毒载体(LV-MEG3)转染PC12细胞后,用含25 mmol∕L葡萄糖的培养基培养;高浓度葡萄糖组(HG 组):用含 250 mmol∕L 葡萄糖的培养基孵育;高浓度葡萄糖+MEG3组(HG+MEG3组):经LV-MEG3转染后用含250 mmol∕L葡萄糖的培养基孵育;高浓度葡萄糖+阴性慢病毒载体(LV-NC)(HG+NC组):经LV-NC转染后用含250 mmol∕L葡萄糖的培养基孵育.培养或孵育1 d后,采用CCK-8法检测细胞活力,流式法检测细胞凋亡率和ROS水平,采用DCFH-DA法检测LDH漏出量;Western blot 法测定细胞色素 c(Cyt c)、caspase-3、caspase-9、Bcl-2、Bax 和Apaf-1的表达水平,计算Blc-2∕Bax比值;荧光法检测线粒体膜通透性转换孔(mPTP)的开放程度.结果 与C组比较,HG组、HG+MEG3组和HG+NC组细胞活力降低,LDH漏出量、ROS水平和细胞凋亡率升高,mPTP开放增加,caspase-3、caspase-9、Cyt c、Bax、Bcl-2、Apaf-1表达上调,HG+MEG3组Bcl-2∕Bax比值升高,HG组和HG+NC组Bcl-2∕Bax比值降低(P<0.05);

作者:玛丽江·木拉提;王志华;陈诚;黄炎;夏萍萍;张帆;王锷;郭曲练;叶治

来源:中华麻醉学杂志 2019 年 39卷 10期

知识库介绍

临床诊疗知识库该平台旨在解决临床医护人员在学习、工作中对医学信息的需求,方便快速、便捷的获取实用的医学信息,辅助临床决策参考。该库包含疾病、药品、检查、指南规范、病例文献及循证文献等多种丰富权威的临床资源。

详细介绍
热门关注
免责声明:本知识库提供的有关内容等信息仅供学习参考,不代替医生的诊断和医嘱。

收藏
| 浏览:89 | 下载:64
作者:
玛丽江·木拉提;王志华;陈诚;黄炎;夏萍萍;张帆;王锷;郭曲练;叶治
来源:
中华麻醉学杂志 2019 年 39卷 10期
标签:
RNA,长链非编码 糖尿病 神经元 细胞凋亡 RNA,long noncoding Diabetes mellitus Neurons Apoptosis
目的 评价长链非编码RNA母系表达基因3(MEG3)在高糖诱发大鼠神经细胞损伤中的作用及其与线粒体途径凋亡的关系.方法 正常培养PC12细胞,采用随机数字表法分为5组(n=18):正常浓度葡萄糖对照组(C组):用含25 mmol∕L葡萄糖的培养基培养;正常浓度葡萄糖+MEG3组(C+MEG3组):MEG3慢病毒载体(LV-MEG3)转染PC12细胞后,用含25 mmol∕L葡萄糖的培养基培养;高浓度葡萄糖组(HG 组):用含 250 mmol∕L 葡萄糖的培养基孵育;高浓度葡萄糖+MEG3组(HG+MEG3组):经LV-MEG3转染后用含250 mmol∕L葡萄糖的培养基孵育;高浓度葡萄糖+阴性慢病毒载体(LV-NC)(HG+NC组):经LV-NC转染后用含250 mmol∕L葡萄糖的培养基孵育.培养或孵育1 d后,采用CCK-8法检测细胞活力,流式法检测细胞凋亡率和ROS水平,采用DCFH-DA法检测LDH漏出量;Western blot 法测定细胞色素 c(Cyt c)、caspase-3、caspase-9、Bcl-2、Bax 和Apaf-1的表达水平,计算Blc-2∕Bax比值;荧光法检测线粒体膜通透性转换孔(mPTP)的开放程度.结果 与C组比较,HG组、HG+MEG3组和HG+NC组细胞活力降低,LDH漏出量、ROS水平和细胞凋亡率升高,mPTP开放增加,caspase-3、caspase-9、Cyt c、Bax、Bcl-2、Apaf-1表达上调,HG+MEG3组Bcl-2∕Bax比值升高,HG组和HG+NC组Bcl-2∕Bax比值降低(P<0.05);