目的:评价丙泊酚对胶质瘤细胞替莫唑胺敏感性的影响及长链非编码RNA-生长阻滞特异性转录因子5(lncRNA-GAS5)在其中的作用。方法:传代培养人U251胶质瘤细胞,以1×10
5/ml密度接种于6孔板、24孔板或96孔板。采用随机数字表法分为5组(
n=30):对照组(C组)、替莫唑胺组(T组)、丙泊酚+替莫唑胺组(PT组)、无意义siRNA+丙泊酚+替莫唑胺组(NPT组)和lncRNA-GAS5-siRNA+丙泊酚+替莫唑胺组(GPT组)。C组U251细胞正常培养;T组U251细胞培养基内加入400 μmol/L替莫唑胺;PT组U251细胞先使用8 μg/ml丙泊酚培养,再更换为400 μmol/L替莫唑胺培养;NPT组和GPT组U251细胞先分别转染无意义siRNA和GAS5-siRNA,48 h后处理同PT组。采用qRT-PCR法测定细胞lncRNA-GAS5的表达;采用CCK-8法测定细胞存活率;采用流式细胞仪测定细胞凋亡率;采用Transwell侵袭实验测定细胞侵袭力;采用Western blot法检测c-Myc、谷胱甘肽-S-转移酶Mu3(GSTM3)和P21的表达。
结果:与C组比较,其余4组细胞存活率降低,凋亡率升高,侵袭细胞数减少,c-Myc和GSTM3表达下调,P21和lncRNA-GAS5表达上调(
P<0.05);与T组比较,PT组和NPT组细胞存活率降低,凋亡率升高,侵袭细胞数减少,c-Myc和GSTM3表达下调,P21和lncRNA-GAS5
作者:程彦;郑李娜;张玮玮;王海云
来源:中华麻醉学杂志 2022 年 42卷 3期