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目的 研究apelin及其受体APJ在人成骨细胞的表达和apelin对成骨细胞的作用.方法 RT-PCR和Western印迹法检测apelin和APJ在人成骨细胞的表达.用apelin处理人成骨细胞,3H掺入法(3H-TdR)和细胞计数法测定细胞的增殖,通过测定细胞内碱性磷酸酶(ALP)活性、骨钙素分泌水平和Ⅰ型胶原的生成来分析细胞功能.Western印迹法检测信号通路的激活.通过小分子干扰核糖核酸(siRNA)技术阻断APJ,观察其对细胞增殖和信号通路的影响.结果 Apelin和APJ在人成骨细胞均有表达,Apelin能促进人成骨细胞增殖,但对其ALP活性、骨钙素的分泌和Ⅰ型胶原的生成无影响.通过siRNA技术阻断APJ能消除apelin对细胞增殖的促进作用.Apelin能诱导人成骨细胞磷脂酰肌醇3激酶(PI3K)下游底物蛋白激酶B(Akt)的活化,但不能诱导c-jun N-端激酶(JNK)、p38和细胞外信号调节激酶1/2(ERK1/2)等丝裂原活化蛋白激酶(MAPK)的活化.siRNA干扰APJ对Akt的活化起抑制作用.PI3K抑制剂(LY294002)能消除apelin对细胞增殖的促进作用和Akt的活化.结论 人成骨细胞表达apelin和APJ,Apelin通过APJ/PI3K/Akt途径促进人成骨细胞增殖,但对其分化无影响.

作者:崔蓉蓉;谢辉;黄佼;袁凌青;卢瑛;杨敏;周后德;伍贤平;罗湘杭;廖二元

来源:中华内分泌代谢杂志 2007 年 23卷 3期

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崔蓉蓉;谢辉;黄佼;袁凌青;卢瑛;杨敏;周后德;伍贤平;罗湘杭;廖二元
来源:
中华内分泌代谢杂志 2007 年 23卷 3期
标签:
Apelin APJ 成骨细胞 RNA干扰 细胞增殖 1-磷脂酰肌醇3-激酶 Akt
目的 研究apelin及其受体APJ在人成骨细胞的表达和apelin对成骨细胞的作用.方法 RT-PCR和Western印迹法检测apelin和APJ在人成骨细胞的表达.用apelin处理人成骨细胞,3H掺入法(3H-TdR)和细胞计数法测定细胞的增殖,通过测定细胞内碱性磷酸酶(ALP)活性、骨钙素分泌水平和Ⅰ型胶原的生成来分析细胞功能.Western印迹法检测信号通路的激活.通过小分子干扰核糖核酸(siRNA)技术阻断APJ,观察其对细胞增殖和信号通路的影响.结果 Apelin和APJ在人成骨细胞均有表达,Apelin能促进人成骨细胞增殖,但对其ALP活性、骨钙素的分泌和Ⅰ型胶原的生成无影响.通过siRNA技术阻断APJ能消除apelin对细胞增殖的促进作用.Apelin能诱导人成骨细胞磷脂酰肌醇3激酶(PI3K)下游底物蛋白激酶B(Akt)的活化,但不能诱导c-jun N-端激酶(JNK)、p38和细胞外信号调节激酶1/2(ERK1/2)等丝裂原活化蛋白激酶(MAPK)的活化.siRNA干扰APJ对Akt的活化起抑制作用.PI3K抑制剂(LY294002)能消除apelin对细胞增殖的促进作用和Akt的活化.结论 人成骨细胞表达apelin和APJ,Apelin通过APJ/PI3K/Akt途径促进人成骨细胞增殖,但对其分化无影响.