目的 探讨HBV感染人近端肾小管上皮细胞系HK-2后对其表达Toll样受体4(TLR4)的影响,并观察TLR4抗HBV感染的生物学作用.方法 收集HBV DNA拷贝在107-102/ml的患者血清,通过显微镜及免疫荧光法观察HBV阳性血清感染HK-2前、后细胞形态及α抗平滑肌抗体(α-SMA)的变化,应用MTT法检测不同浓度TLR4刺激因子(LPS)及TLR4抑制因子(CLI-095)对HK-2细胞增殖的影响.选取10 μL/ml脂多糖(LPS)及5μg/ml CLI-095作用于HBV感染的HK-2细胞,通过细胞免疫荧光技术及免疫印迹法检测HK-2细胞内TLR4蛋白的变化,ELISA法和荧光定量PCR法观测各组细胞上清液中HBsAg、HBeAg和HBV DNA含量的变化.结果 HBV分别感染HK-2细胞12 h和24 h后,随感染时间延长,细胞形态变得不规则,数量也减少.α-SMA的表达水平与感染24 h后相比,在HBV感染12 h后表达最多.LPS浓度在小于10μg/ml范围内,HBV感染HK-2细胞24 h后其增殖程度与剂量呈正相关,与CLI-095浓度呈负相关(P＜0.05).LPS组HK-2细胞TLR4蛋白的表达高于CLI-095组,其上清液中HBV DNA水平及HBsAg、HBeAg表达水平较CLI-095组降低.结论 TLR4可能通过免疫炎症反应参与抑制HK-2细胞中的HBV复制,当HBV感染肾组织细胞时可发挥抗病毒作用.
作者：朱楠；袁伟杰；周益；彭燕；谷立杰；王玲
来源：中华内科杂志 2011 年 50卷 6期
