目的 观察吡非尼酮对甲状腺相关眼病(thyroid associated ophthalmopathy,TAO)患者眼眶成纤维细胞(orbital fibroblast,OF)功能的影响及相关机制.方法 体外培养TAO患者OF,不同浓度(0、250、500、1 000μg/ml)吡非尼酮加入OF培养液中分别培养24、48、72 h,四甲基偶氮唑盐(MTT)比色法检测吡非尼酮对OF增殖的影响,台盼蓝染色法检测细胞存活状态.实时荧光定量PCR(RT-qPCR)检测转化生长因子β1(transforming growth factorβ1,TGFβ1)的表达,酶联免疫吸附法(ELISA)检测吡非尼酮对Ⅰ、Ⅲ型胶原蛋白分泌的影响.结果 (1)TAO眼外肌来源成纤维细胞原代培养成功并稳定传代;(2)各吡非尼酮药物浓度组均可抑制OF的增殖,250、500、1 000 μg/ml吡非尼酮处理72 h后各组增殖率分别为-15.31%、-24.92%、-48.53%,与对照组(0)比较差异均有统计学意义(P值均<0.05),1 000 μg/ml浓度组抑制作用与其他两组差异有统计学意义(P<0.05),同一浓度组作用不同时间的抑制作用差异无统计学意义(P>0.05).250、500、1 000 μg/ml吡非尼酮处理72 h后成纤维细胞的存活率分别为79.21%、78.24%、76.28%,对照组细胞存活率为78.37%,差异无统计学意义(P>0.05).(3) RT-qPCR结果显示,250、500、1 000 μg/ml吡非尼酮处理后各浓度组TGFβ1
作者:李丹丹;刘扬;元荣荣;于彤;杨彬;庞妩燕
来源:中华内科杂志 2019 年 58卷 3期