目的:观察不同浓度双酚A(BPA)对原代培养大鼠睾丸支持细胞(SC)糖代谢及乳酸脱氢酶(LDH)表达的影响,探讨BPA致男性不育的机制. 方法:采用两步酶消化法分离雄性Wistar大鼠睾丸SC,建立SC原代培养模型,免疫组化鉴定FasL.传代后SC随机分为对照组和实验组(100 nmol/L、10 μmol/L和1 mmol/L BPA).培养48 h后,CCK-8法测定细胞增殖活性,核磁共振波谱法测定细胞内代谢物浓度,RT-PCR及Western印迹检测LDH的表达. 结果:体外分离培养SC的纯度为(96.05±1.28)％(n=10),CCK-8实验结果显示:与对照组相比,暴露于100 nmol/L BPA组[(98±8)％]、10 μmol/L BPA组[(96±3)％]和1 mmoL/L BPA组[(95±3)％]的细胞增殖率无明显变化(P＞0.05);核磁共振波谱显示:与对照组相比,10 μmol/L和1 mmol/L BPA作用下SC内葡萄糖及乳酸浓度明显降低(P＜0.05);RT-PCR及Western印迹结果显示:LDH mRNA的表达随BPA浓度升高呈现降低趋势(100 nmol/L、10 μmol/L及1 mmol/L组P均＜0.05),而LDH蛋白的表达只在1 mmol/L组明显降低(P＜0.05). 结论:较高浓度BPA降低LDH,影响SC糖代谢过程.推测BPA通过影响SC糖代谢,减少向生殖细胞乳酸的供给,影响精子发生过程.
作者：黄巍；黄红梅；王红；赵吉存；李勉洲；王洪强；王新生；王沛涛
来源：中华男科学杂志 2015 年 21卷 2期
