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目的 观察Gax基因对低氧性肺动脉内皮细胞(PAECs)增殖和低氧诱导因子-1α(HIF-1α)基因表达的影响,为进一步研究Gax基因调节低氧性肺动脉高压(HPH)的作用与机制奠定基础.方法 取大鼠肺动脉,用酶消化法获取PAECs并进行原代培养;PAECs分4组:未转染常氧对照组(常氧组)、未转染低氧处理组(低氧组)、Ad-βGal转染再行低氧处理组(Ad-βGal+低氧组)、Ad-Gax转染再行低氧处理组(Ad-Gax+低氧组).分别在常氧(21% O2)和低氧(2.5% O2)1 h、3h、6h和12 h各时相点,采用3H-胸腺嘧啶核苷(3H-TdR)掺入法检测PAECs增殖;使用RT-PCR和Weatem blot方法分别检测PAECs中HIF-1αmRNA和蛋白表达水平.结果 ①PAECs的3H-TdR掺入量:与常氧组同时相点比较,低氧组和Ad-βGal+低氧组均显著升高(P均<0.01),在低氧6h达最大值;Ad-Gax+低氧组与常氧组同时相点比较均显著升高(P均<0.01),但与低氧组比较却均明显降低(P<0.01、P<0.05),到低氧6h降幅最大;②在低氧处理6h,与常氧组比较,低氧组和Ad-βGal+低氧组HIF-1α mRNA和蛋白表达均明显上调;与低氧组或Ad-βGal+低氧组比较,Ad-Gax+低氧组HIF-1α mRNA和蛋白表达皆显著下调,差异有统计学意义(P<0.05、P<0.01).低氧早期内皮细胞异常增殖加速,而此时增强Gax基因的表达可抑制细胞的异常增

作者:胡明冬;夏世金;吴俊珍;孙涛;吴金峰;彭正羽;钱桂生

来源:中华肺部疾病杂志(电子版) 2013 年 6卷 6期

知识库介绍

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胡明冬;夏世金;吴俊珍;孙涛;吴金峰;彭正羽;钱桂生
来源:
中华肺部疾病杂志(电子版) 2013 年 6卷 6期
标签:
Gax基因 低氧 肺动脉高压 内皮细胞 增殖 低氧诱导因子-1α Gax gene Hypoxia Pulmonary arterial hypertension Endothelial cell Proliferation Hypoxia-inducible fator-1 α
目的 观察Gax基因对低氧性肺动脉内皮细胞(PAECs)增殖和低氧诱导因子-1α(HIF-1α)基因表达的影响,为进一步研究Gax基因调节低氧性肺动脉高压(HPH)的作用与机制奠定基础.方法 取大鼠肺动脉,用酶消化法获取PAECs并进行原代培养;PAECs分4组:未转染常氧对照组(常氧组)、未转染低氧处理组(低氧组)、Ad-βGal转染再行低氧处理组(Ad-βGal+低氧组)、Ad-Gax转染再行低氧处理组(Ad-Gax+低氧组).分别在常氧(21% O2)和低氧(2.5% O2)1 h、3h、6h和12 h各时相点,采用3H-胸腺嘧啶核苷(3H-TdR)掺入法检测PAECs增殖;使用RT-PCR和Weatem blot方法分别检测PAECs中HIF-1αmRNA和蛋白表达水平.结果 ①PAECs的3H-TdR掺入量:与常氧组同时相点比较,低氧组和Ad-βGal+低氧组均显著升高(P均<0.01),在低氧6h达最大值;Ad-Gax+低氧组与常氧组同时相点比较均显著升高(P均<0.01),但与低氧组比较却均明显降低(P<0.01、P<0.05),到低氧6h降幅最大;②在低氧处理6h,与常氧组比较,低氧组和Ad-βGal+低氧组HIF-1α mRNA和蛋白表达均明显上调;与低氧组或Ad-βGal+低氧组比较,Ad-Gax+低氧组HIF-1α mRNA和蛋白表达皆显著下调,差异有统计学意义(P<0.05、P<0.01).低氧早期内皮细胞异常增殖加速,而此时增强Gax基因的表达可抑制细胞的异常增