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大疱性类天疱疮(BP)存在两个自身抗原:BPAGl(220000~240000)和BPAG2(160000~180000),二者为不同的基因产物。为了研究BP的分子生物学特性,我们通过PCR技术建立了BPAG2片段的cDNA克隆。首先根据已知序列合成了特异引物,下游引物导入Hind Ⅲ酶切位点。然后从人角朊细胞cDNA文库中扩增得到BPAG2氨基端588bp的cDNA片段,经NcoⅠ和HindⅢ酶切位点连入质粒载体pKPL-3a,最后转化受体菌pop2136。我们筛选得到了一个重组阳性克隆,经酶切和测序分析证实重组克隆的插入片段为BPAG2编码细胞内氨基端非胶原区的片段。为进一步研究其体外表达和抗原特性奠定了基础。

作者:李冠群;朱学骏

来源:中华皮肤科杂志 1996 年 29卷 1期

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作者:
李冠群;朱学骏
来源:
中华皮肤科杂志 1996 年 29卷 1期
标签:
类天疱疮,大疱性 抗原 cDNA Pemphigoid,bullous Antigens cDNA
大疱性类天疱疮(BP)存在两个自身抗原:BPAGl(220000~240000)和BPAG2(160000~180000),二者为不同的基因产物。为了研究BP的分子生物学特性,我们通过PCR技术建立了BPAG2片段的cDNA克隆。首先根据已知序列合成了特异引物,下游引物导入Hind Ⅲ酶切位点。然后从人角朊细胞cDNA文库中扩增得到BPAG2氨基端588bp的cDNA片段,经NcoⅠ和HindⅢ酶切位点连入质粒载体pKPL-3a,最后转化受体菌pop2136。我们筛选得到了一个重组阳性克隆,经酶切和测序分析证实重组克隆的插入片段为BPAG2编码细胞内氨基端非胶原区的片段。为进一步研究其体外表达和抗原特性奠定了基础。