目的研究RNA干扰对系统性硬化病(SS)皮肤成纤维细胞结缔组织生长因子(CTGF)mRNA和蛋白表达水平的影响.方法设计4个针对CTGF的特异性小干扰RNA(siRNA)及一个非特异性siRNA.体外转录获得siRNA,将siRNA用6-羧基荧光素(FAM)标记后瞬时转染至原代培养的SS患者皮肤成纤维细胞;转染48 h后,以RT-PCR及蛋白印迹法分别检测CTGFmRNA及蛋白量的变化.结果转染了4个特异性siRNA的成纤维细胞中CTGF mRNA水平均有不同程度下调(P＜0.001),抑制效果由强至弱为,siRNA742＞siRNA828＞siRNA578＞siRNA948.蛋白印迹则显示有3个siRNA能使CTGF蛋白表达水平不同程度下调(P＜0.001),其中siRNA742的抑制效应最强.结论RNA干扰能显著抑制SS成纤维细胞CTGF的表达.
作者：肖嵘；罗婧莹；刘伏友；周英；李亚萍；周怡新；苏玉文；文海泉；杨心洁
来源：中华皮肤科杂志 2006 年 39卷 1期
