目的:探讨腺病毒介导IL-24基因表达载体(Ad-IL-24)对皮肤鳞状细胞癌(鳞癌)细胞COLO 16的凋亡的影响,并探讨其作用机制。方法将构建的Ad-IL-24腺病毒感染COLO 16细胞,qPCR法检测IL-24基因的表达,MTT法检测IL-24过表达对细胞生长的影响,流式细胞仪检测IL-24过表达对COLO 16细胞凋亡的影响,激光扫描共聚焦显微镜观察在IL-24过表达后COLO 16细胞凋亡的形态变化,Western印迹检测Bax,Bcl-2以及活化的caspase 3蛋白水平,qPCR法检测Bax、Bcl-2基因mRNA的表达,免疫荧光方法,检测IL-24过表达后Bax,Bcl-2的表达情况。结果 MTT结果显示,Ad-IL-24组的细胞从第4天开始出现明显抑制,第6天差异最明显(P<0.05),并呈现时间依赖性,而Ad-GFP组与对照组比较,差异无统计学意义(P>0.05)。流式细胞仪显示,Ad-IL-24组的COLO 16细胞凋亡率(13.10±0.92)%,显著高于对照组(3.69±0.36)%(P<0.05)和空载体组(3.39±1.06)%(P<0.05),后两组间比较,差异无统计学意义(P>0.05)。激光扫描共聚焦显微镜显示,Ad-IL-24组细胞加速凋亡。免疫荧光、Western印迹法和QPCR法结果显示,IL-24过表达后Bax在细胞中的表达明显升高,而Bcl-2在细胞中的表达却明显下降。Western印迹法和qPCR法显示
作者:马欣欣;张孟丽;李玲君;曹玉萍;吴秋菊;马鹏程
来源:中华皮肤科杂志 2015 年 9期