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目的:观察JAK2/STAT3信号通路选择性抑制剂AG490对人瘢痕疙瘩成纤维细胞(HKF)生物行为学的影响及可能机制。方法将体外培养的人正常真皮成纤维细胞(HSF)、HKF分别用浓度为12.5、25、50、75、100μmol/L AG490处理为实验组,以不加AG490组为阴性对照组。CCK?8检测各实验组和阴性对照组HSF和HKF培养24、48、72 h后的细胞增殖抑制率;流式细胞仪检测各组HKF培养24 h后的细胞周期分布及细胞凋亡;RT?PCR检测各组HKF培养24 h后,STAT3、细胞周期蛋白D1 mRNA的表达情况,同时检测不予任何药物处理的HSF、HKF中STAT3 mRNA表达;Western印迹法检测各组HSF、HKF培养24 h后STAT3、p?STAT3蛋白表达情况。结果 CCK?8法显示,随AG490药物浓度的增加和作用时间的延长,AG490对HSF、HKF增殖的抑制率增加,且该抑制作用呈浓度和时间依赖性(均P<0.05)。在相同浓度AG490作用相同时间的情况下,HKF增殖抑制率大于HSF(P<0.05)。流式细胞仪显示,随AG490药物浓度的增加,HKF G1期细胞比例逐渐增加(P<0.01), G2期细胞比例逐渐减少(P<0.01),S期细胞无明显变化(P>0.05),细胞凋亡率逐渐增加(P<0.01)。RT?PCR显示,在不予任何加药处理的情况下,体外正常培养HSF、HKF 24 h后,HKF组STAT3 mRNA相对表达量显著高

作者:孙悦鑫;周映;包军

来源:中华皮肤科杂志 2016 年 49卷 11期

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作者:
孙悦鑫;周映;包军
来源:
中华皮肤科杂志 2016 年 49卷 11期
标签:
瘢痕疙瘩 成纤维细胞 细胞周期蛋白D1 STAT3转录因子 AG490 Keloid Fibroblasts Cyclin D1 STAT3 transcription factor AG490
目的:观察JAK2/STAT3信号通路选择性抑制剂AG490对人瘢痕疙瘩成纤维细胞(HKF)生物行为学的影响及可能机制。方法将体外培养的人正常真皮成纤维细胞(HSF)、HKF分别用浓度为12.5、25、50、75、100μmol/L AG490处理为实验组,以不加AG490组为阴性对照组。CCK?8检测各实验组和阴性对照组HSF和HKF培养24、48、72 h后的细胞增殖抑制率;流式细胞仪检测各组HKF培养24 h后的细胞周期分布及细胞凋亡;RT?PCR检测各组HKF培养24 h后,STAT3、细胞周期蛋白D1 mRNA的表达情况,同时检测不予任何药物处理的HSF、HKF中STAT3 mRNA表达;Western印迹法检测各组HSF、HKF培养24 h后STAT3、p?STAT3蛋白表达情况。结果 CCK?8法显示,随AG490药物浓度的增加和作用时间的延长,AG490对HSF、HKF增殖的抑制率增加,且该抑制作用呈浓度和时间依赖性(均P<0.05)。在相同浓度AG490作用相同时间的情况下,HKF增殖抑制率大于HSF(P<0.05)。流式细胞仪显示,随AG490药物浓度的增加,HKF G1期细胞比例逐渐增加(P<0.01), G2期细胞比例逐渐减少(P<0.01),S期细胞无明显变化(P>0.05),细胞凋亡率逐渐增加(P<0.01)。RT?PCR显示,在不予任何加药处理的情况下,体外正常培养HSF、HKF 24 h后,HKF组STAT3 mRNA相对表达量显著高