目的 探索由人羊膜上皮细胞(hAEC)、成纤维细胞与去表皮的真皮(DED)构建组织工程皮肤修复裸鼠全层皮肤缺损的可行性.方法 采用低浓度胰蛋白酶多步消化分离法提取hAEC,并用两步酶消化法处理健康小儿包皮,获得成纤维细胞悬液,传代培养.将体外扩增培养至第3～5代的成纤维细胞和第2代hAEC分别接种在DED真皮面和基底膜面,体外器官培养构建组织工程皮肤.取3～4周龄健康雄性裸鼠20只,抽签法随机分为2组,在所有小鼠背部正中制备全层皮肤缺损模型.组织工程组用构建的组织工程全层皮肤覆盖创面;对照组创面仅覆盖凡士林油纱.分别于术后第7、14、21、28天对裸鼠全身及移植部位大体观察,比较两组间创面愈合时间及创面愈合率,并对移植部位行组织学观察.结果 hAEC具有干细胞特征,免疫荧光显示其表达结合转录因子4(0CT-4)、阶段特异性胚胎抗原4(SSEA-4).器官培养2周后,体外构建的组织工程皮肤形成4～9层复层表皮,且表皮的组织结构形态与正常皮肤类似.移植组织工程皮肤至裸鼠创面后肉眼观察显示,在移植后第7、14、21天,组织工程组创面愈合率分别为57.49％±6.11％、92.80％±3.10％、98.83％±0.25％,均明显高于对照组(22.93％±4.26％、54.57％±7.94％、91.16％±4.79％),差异均有统计学意义(n=10,t值分别为27.36、32.23
作者：江蕾微；刘志；卢彬；周文明；李远英；陆洪光
来源：中华皮肤科杂志 2017 年 50卷 7期
