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目的 探讨光老化对皮肤成纤维细胞降解胞内晚期糖基化终末产物(AGE)的影响.方法 连续长波紫外线(UVA)照射诱导成纤维细胞光老化,通过CCK8法、β半乳糖苷酶染色及细胞凋亡率检测验证模型是否构建成功.取原代成纤维细胞分为4组:光老化组(以UVA照射诱导光老化),菲光老化组(不做处理),光老化+ AGE组(以UVA照射诱导光老化后加入200 mg/L AGE-BSA孵育),非光老化+ AGE组(未诱导光老化细胞中加入200 mg/L AGE-BSA孵育),孵育4~72h后,流式细胞仪检测各组细胞内AGE-BSA荧光强度,激光扫描共聚焦显微镜定位、半定量各组细胞8h点胞内AGE-BSA.ELISA检测各组细胞24 h内AGE-BSA浓度变化.结果 与对照组(未照射UVA)相比,UVA照射组细胞增殖活性显著下降(t=7.559,P<0.05),而凋亡率及β半乳糖苷酶染色阳性率显著升高(t值分别为14.075、43.524,均P<0.05).流式细胞仪检测示,孵育4、8、16、24、48、72 h后,光老化+ AGE组AGE-BSA平均荧光强度分别为293±8.19、359.67±11.59、347±12.29、338±12.77,334.67±14.22、336.3±10.21,非光老化+AGE组分别为222.33±8.74、276.33±6.11、256.33±5.51、243±10.15,236.33±1.53、240.33±1.52,均分别高于相应时间点光老化组和非光老化组,差异均有统计学意义(P<0.05).其中光老化+ AGE

作者:许新雅;郑跃;许庆芳;黎钰莹;黄云芬;龚子鉴;陆春;赖维

来源:中华皮肤科杂志 2018 年 51卷 4期

知识库介绍

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作者:
许新雅;郑跃;许庆芳;黎钰莹;黄云芬;龚子鉴;陆春;赖维
来源:
中华皮肤科杂志 2018 年 51卷 4期
标签:
成纤维细胞 皮肤衰老 细胞衰老 糖基化 Fibroblasts Skin aging Cell aging Glycosylation
目的 探讨光老化对皮肤成纤维细胞降解胞内晚期糖基化终末产物(AGE)的影响.方法 连续长波紫外线(UVA)照射诱导成纤维细胞光老化,通过CCK8法、β半乳糖苷酶染色及细胞凋亡率检测验证模型是否构建成功.取原代成纤维细胞分为4组:光老化组(以UVA照射诱导光老化),菲光老化组(不做处理),光老化+ AGE组(以UVA照射诱导光老化后加入200 mg/L AGE-BSA孵育),非光老化+ AGE组(未诱导光老化细胞中加入200 mg/L AGE-BSA孵育),孵育4~72h后,流式细胞仪检测各组细胞内AGE-BSA荧光强度,激光扫描共聚焦显微镜定位、半定量各组细胞8h点胞内AGE-BSA.ELISA检测各组细胞24 h内AGE-BSA浓度变化.结果 与对照组(未照射UVA)相比,UVA照射组细胞增殖活性显著下降(t=7.559,P<0.05),而凋亡率及β半乳糖苷酶染色阳性率显著升高(t值分别为14.075、43.524,均P<0.05).流式细胞仪检测示,孵育4、8、16、24、48、72 h后,光老化+ AGE组AGE-BSA平均荧光强度分别为293±8.19、359.67±11.59、347±12.29、338±12.77,334.67±14.22、336.3±10.21,非光老化+AGE组分别为222.33±8.74、276.33±6.11、256.33±5.51、243±10.15,236.33±1.53、240.33±1.52,均分别高于相应时间点光老化组和非光老化组,差异均有统计学意义(P<0.05).其中光老化+ AGE