目的 探讨CHOP依赖的内质网应激通路在雷公藤内酯醇诱导黑素瘤A375细胞凋亡中的作用机制.方法 培养人黑素瘤A375细胞,用12.5、25、50、100、200 nmol/L雷公藤内酯醇处理,以不加雷公藤内酯醇处理的细胞作为阴性对照组.分别作用一定时间后,光镜观察A375细胞形态变化,CCK8法检测药物对细胞的增殖抑制作用,以双染色法流式细胞仪检测细胞凋亡,透射电镜观察内质网形态变化,Western印迹检测细胞GRP78、p-PERK、PERK及CHOP蛋白的表达及GRP78蛋白在药物作用下随时间变化的趋势,qPCR检测GRP78、PERK、CHOP mRNA相对表达量.结果 雷公藤内酯醇作用后,A375细胞变为细长梭形,胞质变少,细胞大小不一,形状不规则,出现较多突起.CCK8实验显示,不同浓度雷公藤内酯醇作用A375细胞24、48、72 h均对A375有抑制增殖作用,且与时间、浓度呈依赖关系(P＜0.05),24、48、72 h时半数抑制浓度分别为308、83、55 nmol/L.12.5、25、50、100、200 nmol/L雷公藤内酯醇组细胞凋亡率分别为10.3％±0.1％、14.6％±0.8％、17.4％±0.7％、21.1％±1.0％、29.5％±1.1％,均高于阴性对照组(3.3％±0.4％),差异均有统计学意义(P＜0.05).200 nmol/L雷公藤内酯醇作用A375细胞24 h后透射电镜观察到内质网形态呈现损伤性改变.不同浓度雷公藤内酯醇作用
作者：张亚美；孙悦鑫；陶玥；包军
来源：中华皮肤科杂志 2018 年 51卷 4期
