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目的 观察窄谱中波紫外线(NB-UVB)照射对黑素细胞自噬水平的影响,探讨NB-UVB治疗白癜风的可能机制.方法 体外培养正常人黑素细胞给予单次0(对照组)、50、100和200 mJ/cm2NB-UVB照射,照射后24 h收集细胞,单丹酰戊二胺染色法(MDC)检测细胞自噬体变化,免疫印迹法检测自噬信号磷酸化磷酸腺苷蛋白激酶(p-AMPK)、磷酸化哺乳动物雷帕霉素靶蛋白(p-mTOR)、微管相关蛋白轻链3Ⅱ/Ⅰ (LC3Ⅱ/Ⅰ)及P62表达变化,透射电镜观察自噬体与黑素小体超微结构变化.免疫印迹结果采用单因素方差分析进行比较,黑素小体、自噬体与自噬溶酶体数量采用Kruskal-Wallis H检验进行统计分析.结果 MDC染色显示,对照组、50、100和200 mJ/cm2 NB-UVB组自噬体染色阳性率分别为(21.83±3.50)、(23.66±4.12)、(38.08±4.10)、(40.23±1.45)%,100、200 mJ/cm2组显著高于对照组和50 mJ/cm2 NB-UVB组(均P<0.05).免疫印迹法显示,与对照组相比,100、200 mJ/cm2组p-AMPK、LC3Ⅱ/Ⅰ表达均显著上调(均P<0.05),而p-mTOR及P62表达均显著下降(均P<0.05).透射电镜结果显示,与对照组自噬体与自噬溶酶体数量(1.88±1.18)相比,100、200 mJ/cm2组(5.12±1.13、5.25±1.04)均显著增多(P<0.05).50、100、200 mJ/cm2组黑素小体数量(39.12±9.42、57.38±7.11

作者:王敏;耿清伟;高亚丽;华优;宋秀祖

来源:中华皮肤科杂志 2018 年 51卷 9期

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作者:
王敏;耿清伟;高亚丽;华优;宋秀祖
来源:
中华皮肤科杂志 2018 年 51卷 9期
标签:
黑素细胞 白癜风 自噬 紫外线疗法 黑素小体 Melanocytes Vitiligo Autophagy Ultraviolet therapy Melanosomes
目的 观察窄谱中波紫外线(NB-UVB)照射对黑素细胞自噬水平的影响,探讨NB-UVB治疗白癜风的可能机制.方法 体外培养正常人黑素细胞给予单次0(对照组)、50、100和200 mJ/cm2NB-UVB照射,照射后24 h收集细胞,单丹酰戊二胺染色法(MDC)检测细胞自噬体变化,免疫印迹法检测自噬信号磷酸化磷酸腺苷蛋白激酶(p-AMPK)、磷酸化哺乳动物雷帕霉素靶蛋白(p-mTOR)、微管相关蛋白轻链3Ⅱ/Ⅰ (LC3Ⅱ/Ⅰ)及P62表达变化,透射电镜观察自噬体与黑素小体超微结构变化.免疫印迹结果采用单因素方差分析进行比较,黑素小体、自噬体与自噬溶酶体数量采用Kruskal-Wallis H检验进行统计分析.结果 MDC染色显示,对照组、50、100和200 mJ/cm2 NB-UVB组自噬体染色阳性率分别为(21.83±3.50)、(23.66±4.12)、(38.08±4.10)、(40.23±1.45)%,100、200 mJ/cm2组显著高于对照组和50 mJ/cm2 NB-UVB组(均P<0.05).免疫印迹法显示,与对照组相比,100、200 mJ/cm2组p-AMPK、LC3Ⅱ/Ⅰ表达均显著上调(均P<0.05),而p-mTOR及P62表达均显著下降(均P<0.05).透射电镜结果显示,与对照组自噬体与自噬溶酶体数量(1.88±1.18)相比,100、200 mJ/cm2组(5.12±1.13、5.25±1.04)均显著增多(P<0.05).50、100、200 mJ/cm2组黑素小体数量(39.12±9.42、57.38±7.11