目的 探讨动力相关蛋白1(dynamin-related protein 1,DRP1)基因沉默对人胃癌细胞株MKN-45奥沙利铂敏感性的影响及其可能的机制.方法 构建靶向DRP1基因的短发夹状RNA(shRNA)慢病毒载体,转染至293T细胞,再感染MKN-45细胞,用qRT-PCR鉴定沉默效率.用终浓度为0.5、1.0、2.0、4.0、8.0、16.0及32.0 μg/ml的奥沙利铂分别处理实验组、阴性对照组(NC组)和空白对照组(CON组),48 h后采用MTT实验检测细胞存活率并计算半数抑制浓度(IC50),流式细胞术检测细胞凋亡,Westem blot检测LC3-Ⅱ和p62表达.结果 实验组的DRP1 mRNA(0.087±0.025)显著低于NC组(1.040±0.020)和CON组(1.027±0.021)(均P＜0.001).随奥沙利铂浓度增加,实验组的细胞存活率明显降低(均P ＜0.001).实验组的IC5.值(14.1±0.4) μg/ml较NC组(20.0±1.1) μg/ml和CON组(20.0±1.8) μg/ml降低(均P＜0.01);实验组的细胞凋亡率(9.4％±1.1％)较NC组(6.4％±0.8％)和CON组(6.5％±1.0％)升高(均P＜0.05);实验组的LC3-Ⅱ(0.36±0.03)较NC组(0.62±0.04)和CON组(0.59±0.07)降低(均P＜0.01);实验组的P62(0.58±0.04)较NC组(0.39±0.04)和CON组(0.36±0.04)升高(均P＜0.01). 结论 DRP1介导的线粒体自噬提高了MKN-45细胞对奥沙利铂的敏感性.

作者：徐晓武；杨小敏；胡经纬；郑志强；李德春

来源：中华普通外科杂志 2017 年 32卷 9期