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目的 研究活化性杀伤细胞免疫球蛋白样受体(KIR)KIR2DS1阳性的自然杀伤(NK)细胞对急性髓系白血病(AML)靶细胞的杀伤作用;并探讨NK细胞KIR及人类白细胞抗原Cw位点(HLA-Cw)与靶细胞HLA-Cw错配对靶细胞的杀伤机制.方法 获取健康供者的外周血,经Dnyal磁珠负选高纯度NK细胞;取初治确诊的AML患者新鲜骨髓液,分离后的白血病细胞作为靶细胞.用抗CD158a和CD158b单克隆抗体封闭NK细胞抑制性KIR(如:KIR2DL1、KIR2DL2和KIR2DL3),并用噻唑蓝(MTT)比色法分别检测抑制性KIR封闭前和封闭后NK细胞对靶细胞的杀伤作用.采用聚合酶链反应和顺序特异性引物(PCR-SSP)基因分型技术分别检测NK细胞及靶细胞的KIR基因和HLA-Cw;根据HLA-Cw将NK细胞和靶细胞分别分为C1组(表达HLA-Cw 01、03、07、08、12、14、16分子)、C2组(表达HLA-Cw02、04、05、06、15、17、18分子)和C1/C2组(既表达C1组的等位基因又表达C2组的等位基因).结果 分选后的NK细胞经流式细胞仪检测,其纯度为(90.8±6.08)

作者:赖艳丽;曹祥山;吴强;邱国强;顾伟英;陈生

来源:中华器官移植杂志 2009 年 30卷 6期

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作者:
赖艳丽;曹祥山;吴强;邱国强;顾伟英;陈生
来源:
中华器官移植杂志 2009 年 30卷 6期
标签:
造血干细胞移植 杀伤细胞,天然 受体,聚合免疫球蛋白 Hematopoietic stem cell transplantation Killer cells,natural Receptors,polymeric immunoglobulin
目的 研究活化性杀伤细胞免疫球蛋白样受体(KIR)KIR2DS1阳性的自然杀伤(NK)细胞对急性髓系白血病(AML)靶细胞的杀伤作用;并探讨NK细胞KIR及人类白细胞抗原Cw位点(HLA-Cw)与靶细胞HLA-Cw错配对靶细胞的杀伤机制.方法 获取健康供者的外周血,经Dnyal磁珠负选高纯度NK细胞;取初治确诊的AML患者新鲜骨髓液,分离后的白血病细胞作为靶细胞.用抗CD158a和CD158b单克隆抗体封闭NK细胞抑制性KIR(如:KIR2DL1、KIR2DL2和KIR2DL3),并用噻唑蓝(MTT)比色法分别检测抑制性KIR封闭前和封闭后NK细胞对靶细胞的杀伤作用.采用聚合酶链反应和顺序特异性引物(PCR-SSP)基因分型技术分别检测NK细胞及靶细胞的KIR基因和HLA-Cw;根据HLA-Cw将NK细胞和靶细胞分别分为C1组(表达HLA-Cw 01、03、07、08、12、14、16分子)、C2组(表达HLA-Cw02、04、05、06、15、17、18分子)和C1/C2组(既表达C1组的等位基因又表达C2组的等位基因).结果 分选后的NK细胞经流式细胞仪检测,其纯度为(90.8±6.08)