目的 观察转化生长因子β1 (TGF-β1) 对骨髓来源巨噬细胞 (BMDM) 的影响, 探讨Wnt信号调控该过程的作用与机制.方法 无菌分离获取小鼠BMDM, 以集落刺激因子 (M-CSF) 作为刺激因素, 于37℃、5%CO2培养箱中培养7d, 倒置相差显微镜观察细胞形态改变, 流式细胞仪鉴定BMDM纯度.后以TGF-β1作为干预因素, 分别设立对照组 (A组:a-MEM高糖培养基+M-CSF) 、实验组 (B组:a-MEM高糖培养基+M-CSF+TGF-β1), M-CSF浓度为60 ng/ml, TGF-β1浓度为5 ng/ml.以α-SMA作为肌成纤维细胞表面标志物, 以F4/80作为巨噬细胞表面标志物, 3 d后流式检测α-SMA+F4/80+细胞比例、Western blot测定各组Wnt3a、DVL (dishevelled蛋白) 、β-catenin蛋白的表达.应用SPSS 19.0统计软件进行数据处理.结果 M-CSF刺激骨髓细胞7 d后流式检测BMDM比例最高, 纯度达 (94.44±6.11) %.以M-CSF诱导7d为分组时间点, 与对照组相比较, 3 d后实验组α-SMA+F4/80+细胞比例明显升高 (t=6.365, P=0.0007), Wnt3a、DVL、β-catenin的蛋白表达也显著增高 (tWnt3a=12.06, P<0.0001;tDVL=8.168, P=0.0002, tβ-catenin=6.752, P=0.0005) .结论TGF-β1可刺激BMDM向肌成纤维细胞转化;Wnt信号通路可能参与调控BMDM的纤维化过程;通过降低巨噬细胞Wnt信号通路的
作者:冯晓剑;杨莹;王利华;袁瑞霞
来源:中华肾病研究电子杂志 2018 年 7卷 3期