目的研究非病毒载体脂质体、人工合成多聚物对基因治疗体内实验的方法,以期筛选出能提高基因治疗体内实验方法表达效率的理想载体.方法分子克隆方法构建多种人生长激素基因真核表达载体,分别和脂质体LipofectAMINETM、多聚物聚乙烯吡咯烷酮(PVP)结合,大鼠胫前肌肌肉注射,2周时注射部位肌肉匀浆后PCR、RT-PCR分别检测hGH载体、hGHmRNA,放射免疫法检测血清中hGH.结果构建的真核表达载体经酶切、PCR、测序鉴定正确,各hGH载体骨骼肌肌肉注射后PCR、RT-PCR均为阳性,血清也均得到表达.质粒载体与LipofectAMINETM、PVP结合后,hGH表达均高于裸露质粒组,并且LipofectAMINETM的表达高于PVP.结论对非病毒载体的基因治疗的体内实验中发现,脂质体LipofectAMINETM、多聚物PVP能提高目的基因的表达效率.
作者：杨孔宾；戴钦舜；胡志强；王超；初明；董齐；胡恩喜；杨富明；刘恩重
来源：中华神经外科杂志 2003 年 19卷 3期
