目的 用自噬抑制剂3-甲基腺嘌呤(3-methyladenine,3-MA)抑制自噬,观察其对顺铂诱导的U251细胞凋亡的影响及其作用机制.方法 MTT法检测3-MA对顺铂诱导的U251细胞生长抑制的影响;Hoechst33342染色,观察3-MA对顺铂诱导细胞凋亡的影响;蛋白免疫印迹法检测内质网应激(endoplasmic reticulum stress,ERS)相关蛋白,泛素化蛋白(ubquitinated proteins Ub1),蛋白二硫键异构酶(protein disulfide isomerase,PDI),葡萄糖调节蛋白78(glucose-regulated protein78,Grp78)的表达,并检测了C/EBP环磷酸腺苷反应元件结合转录因子同源蛋白(C/EBP homologous protein,CHOP),活化的Caspase-4和活化的Caspase-3的表达水平;免疫荧光染色后共聚焦显微镜观察3-MA与顺铂联合作用于U251细胞,微管相关蛋白轻链3(microtubule-associated protein 1 light chain 3,LC3)、PDI的表达.结果 MTT结果显示,3-MA可以促进顺铂对U251生长抑制(顺铂组与对照组相比,P=0.00324;联合组与顺铂组相比P=0.02249),Hoechst33342染色结果显示3-MA可以促进顺铂对U251凋亡诱导作用;免疫印迹法结果显示,3-MA增加了顺铂诱导的细胞内泛素化蛋白、ERS标志蛋白PDI、Grp78的表达(顺铂组与对照组相比,P值分别为0.00294,0.0012,0.00179;联合组与顺铂组相比,P值分别为
作者:张瑞剑;陈谦学
来源:中华神经外科杂志 2015 年 31卷 4期